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鐵皮石斛的莖段快繁

發(fā)布時間:2024-04-24
鐵皮石斛dendrobium officinale kimura et migo是蘭科石斛屬多年生附生草本植物,因其莖節(jié)處呈黑褐色,又名黑節(jié)草,具有益胃生津、滋陰清熱、清咽利嗓,提高人體免疫能力、抗腫瘤、抗衰老等功效,主要分布于云南廣南、邱北、馬關、文山及怒江與恩梅開江的分水嶺一帶,海拔1600米以下,以及江南各省。多附生在亞熱帶人跡罕至的深山密林陰濕懸崖峭壁處、樹上或長青苔的巖石上。
鐵皮石斛的種子極小、無胚乳,自然條件下需與某些真菌共生才能萌發(fā),很難用實生苗栽培;而傳統(tǒng)的分株、扦插等方式的繁殖率極低,加上人為的過度采挖和破壞生態(tài)環(huán)境,其資源已瀕臨滅絕,因而被國家列為重點保護的藥用植物之一,鐵皮石斛組織培養(yǎng)快速繁殖被國內外學者廣泛關注。鐵皮石斛的莖段快繁直接取材于幼嫩莖段,具有取材易、速度快、污染率低、繁殖系數高等優(yōu)點,可在短期內為生產提供大量栽培用苗,因而能有效保護這一寶貴資源。
1.外植體的消毒
石斛莖段在無菌操作臺上用75%的酒精進行表面消毒,去掉灰塵,再用0.1%的升汞滅菌5~8分鐘,用無菌水沖洗3次,在此過程中應不斷搖晃燒杯,使其充分滅菌。
2.試驗過程
將已經滅菌的石斛莖段,在無菌條件下切成至少帶有一個莖節(jié)的莖段,接種于誘導培養(yǎng)基中誘導出芽,將芽再誘導出原球莖,原球莖再分化,再壯苗,便可將生長健壯的植株移栽。
3.培養(yǎng)基
基本培養(yǎng)基為n6,附加0.75%瓊脂,3%白糖,ph值為5.8,培養(yǎng)基進行常規(guī)高溫高壓滅菌,溫度為121℃,1.1mpa,15分鐘即可。激素添加如下①誘導莖節(jié)發(fā)芽:n6+ba2.5毫克/升;②誘導芽形成原球莖:n6+ba2.5毫克/升+i-ba 0.5毫克/升;③誘導原球莖分化為植株:n6+ba 1.5毫克/升+naa 1.2毫克/升+香蕉汁5%;④生根壯苗培養(yǎng):n6+naa 2.5毫克/升+土豆汁10%。
或基本培養(yǎng)基為ms,附加0.75%瓊脂,3%白糖,ph5.8。(1)芽增殖培養(yǎng)基:ms+naa 0.1~0.5毫克/升+ba0.5~2.0毫克/升;(2)壯苗培養(yǎng)基:ms無激素培養(yǎng)基;(3)生根培養(yǎng)基:1/2ms+iba0.1毫克/升。
4.培養(yǎng)條件:
溫度控制在25±1℃,日光燈照射,每天12小時。
5.移栽
移栽時先將已經長大的石斛種苗取出,用清水洗去根部的培養(yǎng)基,洗凈為止,動作要輕,避免損傷其根和葉。然后栽種在以礦質巖:泥炭土為1∶1的基質中。放在遮蔭棚里練苗一周,便可正常管理,保持濕度80%,溫度不可超過35℃,不接受長時間的陽光直射。
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