在細胞實驗室里,污染是細胞培養(yǎng)的*大害,預(yù)防和避免細胞污染是細胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵之一。細胞培養(yǎng)過程中細胞污染的來源有哪些?
細胞污染的來源
細胞培養(yǎng)過程中細胞污染的來源主要有以下幾條途徑:
1、不潔的動物組織標(biāo)本
很多動物組織本該是無菌的(直接與外界相通的呼吸道和消化道、泌尿系統(tǒng)除外),但由于取材時不小心也會有污染的機會。組織本身含有細菌,如取材時不用濃的抗生素洗液洗滌浸泡,也會帶菌,造成細胞污染。
2、空氣
空氣中含有大量的微生物,如果操作室與外界隔離不嚴(yán)或消毒不充分下,很容易造成細胞污染。另外,凈化工作臺使用過久,濾板未定期更換或*不更換,濾氣受塵埃堵塞,工作時不帶kou罩或外界氣流過強,污染空氣進入操作區(qū),也會導(dǎo)致污染。春夏季南方地區(qū)多雨,空氣濕度大,含菌量多,工作不注意也易造成污染。
3、清洗消毒
培養(yǎng)用物品、材料洗刷不凈,培養(yǎng)用液和器材滅菌不*也會引入微生物和有毒物質(zhì)。
4、操作不當(dāng)
來自操作者的污染主要有以下幾方面:
1)器材和溶液使用前未仔細檢查是否污染過,或者是否已經(jīng)消毒滅菌處理過,或者雖經(jīng)處理,時隔已久又末重新處理。
2)操作者未戴kou罩、帽子,呼出氣中排出細菌和支原體。
3)培養(yǎng)瓶口未用75%酒精擦和燒灼。
4)操作者不當(dāng)心,動作不正確而將吸管或無菌器具碰到了污染的物品,如手上皮膚和瓶子外壁等。
5)細胞傾液時倒出培養(yǎng)瓶或者滴落在超凈臺上,未及時擦凈或者灼燒。
6)灼燒的火不夠旺。
7)移液管吸取液體時將空氣中的氣流吸入培養(yǎng)瓶中。
8)長時間的將離心管放在離心機中,可能由于口沒有*封閉而造成污染。
9)同一根吸管或者放置吸管的離心管長時間使用會造成一管污染多瓶細胞交叉污染。
10)操作者來回走動揚起灰塵等。
5、血清
市面上出售的血清滅菌不*,潛在病毒和支原體污染