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發(fā)酵過程的代謝調(diào)控-發(fā)酵工藝過程控制

發(fā)布時(shí)間:2024-05-04
發(fā)酵過程的代謝調(diào)控-發(fā)酵工藝過程控制
微生物在長期的進(jìn)化過程中形成了整套可塑性強(qiáng)和精確的代謝調(diào)節(jié)系統(tǒng),可以通過自我調(diào)節(jié)使機(jī)體內(nèi)的代謝途徑與代謝類型互相協(xié)調(diào)與平衡,經(jīng)濟(jì)合理地利用和合成所需的各種物質(zhì)和能量,使細(xì)胞處于平衡生長狀態(tài)。因此,在正常生長狀態(tài)下,微生物通常不會(huì)過量積累初代謝產(chǎn)物,過量積累的中間代謝產(chǎn)物也能夠被誘導(dǎo)酶轉(zhuǎn)化為次代謝產(chǎn)物。
微生物的自我調(diào)節(jié)部位受到三種方式的控制:調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)透過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞的能力;通過酶的定位以限制它與相應(yīng)底物接近;調(diào)節(jié)代謝流。其中以調(diào)節(jié)代謝流的方式為重要,它又包括兩個(gè)方面:是調(diào)節(jié)酶的合成量,常稱為“粗調(diào);二是調(diào)節(jié)現(xiàn)有酶分子的催化活力,又稱作“細(xì)調(diào)。兩者往往密切配合和協(xié)調(diào),以達(dá)到佳調(diào)節(jié)效果。實(shí)際上,上述三種控制方式都涉及酶促反應(yīng)調(diào)節(jié)。酶促調(diào)節(jié)方式包括酶活性調(diào)節(jié)和酶合成調(diào)節(jié)兩大類。酶活性調(diào)節(jié)通過酶的激活作用或酶的抑制作用進(jìn)行,目前研究得為清楚的調(diào)節(jié)機(jī)制是酶的變構(gòu)理論和酶分子的化學(xué)修飾調(diào)節(jié)理論,前者是通過酶分子空間構(gòu)型上的變化來引起酶活性的改變,后者則是通過酶分子本身化學(xué)組成上的改變來引起酶活性的變化。酶合成調(diào)節(jié)方式主要通過影響酶合成或酶合成速率來控制酶量變化,終達(dá)到控制代謝過程的目的。在某種化合物作用下,如導(dǎo)致某種酶合成或酶合成速率提高,屬于誘導(dǎo)作用;相反,如是導(dǎo)致某種酶合成停止或酶合成速率降低,則屬于酶的阻遏作用。酶活性調(diào)節(jié)和酶合成調(diào)節(jié)往往同時(shí)存在于同個(gè)代謝途徑中,使有機(jī)體能夠迅速、準(zhǔn)確和有效地控制代謝過程。
在微生物發(fā)酵工業(yè)中,往往需要超量積累某種代謝產(chǎn)物,以獲得人們所期望的目標(biāo)產(chǎn)物,提高生產(chǎn)效率。為達(dá)到這目的,必須打破微生物原有的代謝調(diào)控系統(tǒng),讓微生物建立新的代謝方式,高濃度地積累人們所期望的代謝產(chǎn)物。常采用的方式有兩種:種是通過各種育種方法,改變微生物遺傳特性,從根本上改變微生物的代謝;另種是發(fā)酵過程的代謝調(diào)控,即根據(jù)代謝調(diào)節(jié)的理論,通過改變發(fā)酵工藝條件(如ph、溫度、通氣量、培養(yǎng)基組成等)改變菌體內(nèi)的代謝平衡,大限度積累對(duì)人類有用的代謝產(chǎn)物。
下面討論的主要是后種調(diào)控方式。
①控制不同的發(fā)酵條件,從而改變其代謝方向,進(jìn)而達(dá)到獲得高濃度積累所需產(chǎn)物的目標(biāo)。同種微生物在同樣的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),只要控制不同的發(fā)酵條件,就有可能獲得不同的代謝產(chǎn)物。如啤酒酵母在中性和酸性條件下培養(yǎng),可將葡萄糖氧化生成乙醇和二氧化碳;當(dāng)在培養(yǎng)基中加入亞硫酸氫鈉或在堿性條件下培養(yǎng)時(shí),則主要生成甘油。又如發(fā)酵,通氣較好時(shí)生成,通氣不足時(shí)則生成乳酸;只有當(dāng)nh+4過量時(shí)才積累,當(dāng)nh+4不足時(shí)則主要生成c酮戊二酸。
②使用誘導(dǎo)物或添加前體物也是發(fā)酵工業(yè)中常用于提高目標(biāo)產(chǎn)量的方法。許多與蛋白質(zhì)、糖類或其他物質(zhì)降解有關(guān)的酶類都是誘導(dǎo)酶,在發(fā)酵過程中加入相應(yīng)的底物或底物類似物作為誘導(dǎo)物,可以有效地增加這些酶的產(chǎn)量。例如,?;赴l(fā)酵時(shí),可用為誘導(dǎo)物;在木毒發(fā)酵生產(chǎn)纖維素酶中,加入槐糖可以誘導(dǎo)纖維素酶的合成,而加入木糖可以誘導(dǎo)半纖維素酶的生成。有些氨基酸、核苷酸和抗生素發(fā)酵必須添加前體物質(zhì)才能獲得較高的產(chǎn)率。例如,是合成的個(gè)前體,在發(fā)酵過程中加入可以大幅度提高發(fā)酵產(chǎn)量。
③在發(fā)酵培養(yǎng)基中通常采用適量的速效和遲效碳源、氮源的配比,來滿足機(jī)體生長的需要和避免速效碳源、氮源可能引起的分解代謝阻遏。例如,用甘油代替果糖作為碳源培養(yǎng)嗜熱脂肪酵母,可以使的產(chǎn)量提高25倍以上;用甘露糖代替乳糖作為培養(yǎng)熒光假單胞菌的碳源,可使纖維素酶產(chǎn)量提高1500倍以上。
④使用影響細(xì)胞通透性的物質(zhì)作為培養(yǎng)基的成分,有利于代謝產(chǎn)物分泌,從而避免未端產(chǎn)物的反饋調(diào)節(jié)。常用于改變細(xì)胞膜通透性的物質(zhì)有、表面活性劑等。前者能抑制細(xì)胞壁肽聚糖合成中肽鏈的交聯(lián);后者可以將脂類從細(xì)胞壁中溶解出來,使細(xì)胞壁疏松。如在里氏木霉發(fā)酵過程中加入吐溫80,能增加細(xì)胞膜通透性,可提高纖維素酶的產(chǎn)量??刂苖n2+、zn2+的濃度,也可以干擾細(xì)胞膜或細(xì)胞壁的形成。另外,也可通過誘變育種篩選細(xì)胞透性突變株來實(shí)現(xiàn)。
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