酶聯(lián)接免疫吸附劑測定(enzyme-linkedimmunosorbnentassay)是elisa的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。elisa是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。elsia試驗(yàn)所用試劑器材:
一、試劑:
1、 包被緩沖液(ph9.60.05m碳酸鹽緩沖液):
naco31.59克 nahco3 2.93克加蒸餾水至1000ml
2、洗滌緩沖液(ph7.4pbs):0.15m kh2po40.2克 na2hpo4·12h2o 2.9克 nacl8.0克kcl0.2克tween-200.05%0.5ml加蒸餾水至1000ml
3、 稀釋液:牛血清白蛋白(bsa)0.1克 加洗滌緩沖液至100ml 或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
4、終止液(2mh2so4):蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
5、底物緩沖液(ph5.0磷酸棗檸檬酸):0.2mna2hpo4(28.4克/l)25.7ml 0.1m檸檬酸(19.2克/l)24.3ml 加蒸餾水50ml。
6、tmb(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:tmb(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml底物緩沖液(ph5.5)10ml0.75%h2o232μl
7、abts使用液:abts 0.5mg 底物緩沖液(ph5.5)1ml 3%h2o2 2μl
8、抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。
9、正常人血清和陽性對照血清。
二. 器材:
1、聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標(biāo)板)40孔或96孔,elisa檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。
2、 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
3、4℃冰箱,37℃孵育箱。
關(guān)鍵詞:吸附劑