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油茶隨機擴增多態(tài)dna條件的研究

發(fā)布時間:2023-10-05
以改進的ctab法提取油茶嫩葉總dna,進行隨機擴增多態(tài)dna(rapd分析,分別測試了mg^2+濃度、引物濃度、dntp濃度、模板dna濃度和taq dna聚合酶用量對反應(yīng)結(jié)果的影響,確定了油茶rapd分析的最適反應(yīng)體系:在25μipcr反應(yīng)體積中,含20ng模板dna,2.5mmol.l^-1 mgcl2,0.2mmol.l^-1dntp,0.3μmol.l^-1引物,lu taq dna聚合酶。擴增程序為:94℃預(yù)變性180s;94℃變性60s,37℃退火90s,72℃延伸120s,反應(yīng)40個循環(huán);最后在72℃延伸5min。完成機構(gòu):[1]福建師范大學(xué)生物工程學(xué)院,福建福州350007 [2]福建省林業(yè)廳,福建福州350003 [3]福建閩侯桐口國有林場,福建閩侯350100
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