麥?zhǔn)媳葷峁苁莔cfarland發(fā)明的一種用于微生物比濁的不同濁度的標(biāo)準(zhǔn)濁度管。具體的配制方法是根據(jù)硫酸和氯化鋇的比例來定的,有表可查,這樣不同比例生成的硫酸鋇沉淀的濃度不同,且都有定值。
麥?zhǔn)媳葷峁艿呐浔热缦拢?br>管 號 (mcfarland)
0.5
1
2
3
4
5
0.25%bacl 2 ( ml )
0.2
0.4
0.8
1.2
1.6
2.0
1%h 2 so 4 (ml)
9.8
9.6
9.2
8.8
8.4
8.0
細菌的近似濃度 ( × 10 8 /ml)
1
3
6
9
12
15
操作方法:
1、輕搖標(biāo)準(zhǔn)試管。
2、無菌操作將被測定的肉湯培養(yǎng)物加到與標(biāo)準(zhǔn)管相同直徑(大小)的無菌試管中。
3、以無菌操作向被測定試管加入無菌生理鹽水(nacl),直到濃度與所要求的標(biāo)準(zhǔn)管的濃度相同。
使用技巧:
1、直接用眼睛看(需要經(jīng)驗,誤差較大)。
2、找張白紙,打上平行直線,然后看(如圖示,利用光在不同濃度液體折射不同)。
注意事項:
1、如果測定的肉湯培養(yǎng)物不澄清,由培養(yǎng)物的值減去未接種培養(yǎng)基的值來校正細菌濃度。4號管(肉湯培養(yǎng)物)-1號管(孵育過的未接種的肉湯管)=3號管(校正讀數(shù))。
2、如果肉湯顏色很深,把未接種試管放在標(biāo)準(zhǔn)管的后面讀數(shù)即可。
編者注:
1、測定好的細菌,最好做一下梯度稀釋涂布計數(shù)。
2、此濃度是對應(yīng)的大腸桿菌的濃度,如果是其他細菌,會有一定的差別,但編者做過的幾個菌差別都在一個數(shù)量級之內(nèi),適合于普通實驗。
3、此種方法測定的準(zhǔn)確性不是很高,如果是對細菌數(shù)量要求較精確的,請用紫外分光光度計。