《中國藥典》對部分中藥材中afb1的*規(guī)定為5µg/kg,黃曲霉毒素總*為10µg/kg。
目前來講,黃曲霉毒素aft的檢測方法有液相色譜法(hplc),酶聯(lián)免疫檢測法等。液相色譜法可以的檢測中藥材中黃曲霉毒素的微小含量。而使用黃曲霉毒素elisa試劑盒則能夠快速而準(zhǔn)確的分析樣品中黃曲霉毒素殘留。
泰樂祺科技作為國內(nèi)專業(yè)從事霉菌毒素檢測技術(shù)與產(chǎn)品服務(wù)的供應(yīng)商,泰樂祺檢測應(yīng)用實(shí)驗(yàn)室重點(diǎn)關(guān)注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等問題,針對上述情況,提出了以下解決方案。
免疫親和柱+krc光化學(xué)柱后衍生法
1.簡介
pribofast黃曲霉毒素b+g免疫親和柱(編號iac-010-3)可選擇性吸附樣品液中的毒素,從而對毒素樣品起到非常針對性的純化作用,然后用hplc/fld+krc柱后衍生系統(tǒng)可以有效的測定黃曲霉毒素b1、b2、g1、g2、濃度,提高檢測的準(zhǔn)確性和靈敏度。
2.免疫親和柱/krc衍生法特點(diǎn):
•采用高特異性的抗體。
•柱容量高、柱體積大,穩(wěn)定的純化效率;
•柱內(nèi)膠含量高,保證穩(wěn)定的回收率;
•符合國內(nèi)外*
•純化后直接用于elisa法,液相色譜法,熒光光度法等。
•適用于各種復(fù)雜基質(zhì)樣品處理
•衍生化操作方便,光化學(xué)衍生化無需使用衍生試劑(通常電化學(xué)柱后衍生均需要使用衍生試劑,分析成本高,操作麻煩,儀器故障率較高)。
•回收率高,達(dá)到90%以上
3.免疫親和柱法操作步驟簡介:
1)樣品處理
•準(zhǔn)確稱取25g粉狀樣品,溶于125ml甲醇/水(70/30)中;
.加入5.0g氯化鈉以均質(zhì)器高速攪拌,提取2分鐘;
.4000r/min離心5min或用槽紋濾紙過濾;
.取15ml濾液并加入30ml水稀釋,用玻璃微纖維濾紙過濾;
.取稀釋后液體待測;
.將免疫親和柱連接于20.0ml玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取15.0ml樣品提取液注入玻璃注射器;
.將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約6ml/min流速緩慢通過免疫親和柱,直至2~3ml空氣通過柱體;
.以10.0ml水淋洗柱子2次,棄去全部流出液,并使2ml~3ml空氣通過柱體;
.準(zhǔn)確加入1.0ml色譜級甲醇洗脫,流速為1ml/min~2ml/min,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。
•2)測定:hplc直接進(jìn)樣,經(jīng)黃曲霉毒素色譜柱、krc光化學(xué)柱后衍生化后熒光檢測器直接記錄并計(jì)算出黃曲霉毒素b1b2g1g2濃度;
pribofastkrc柱后衍生器和hplc參數(shù)(符合gb23212-2008)
pribofastkrc-25柱后光化學(xué)衍生器紫外燈波長:254nm
hplc-色譜柱:黃曲霉毒素色譜柱150x4.6mm;c-18
流動相:甲醇-水45:55
流量:1.0ml/min
柱溫:35°c
進(jìn)樣體積:20μl
熒光檢測器:λ-激發(fā)波長:365nmλ-發(fā)射波長:455nm
液相色譜儀檢測配置;
液相色譜儀帶有熒光檢測器;
pribofastkrc-25柱后光化學(xué)衍生裝置,配有納米燈管254nm,25米ftfe線圈。
黃曲霉毒素色譜柱c18150x4.6mm