gpc色譜柱用于分離水溶性聚合物,例如,低聚糖、多糖以及陽離子、陰離子、中性聚合物等。這種高分辨率的gpc色譜柱具有如下的優(yōu)點:ph范圍寬(1-12)、允許高有機溶劑含量的流動相(流動相中有機溶劑含量可以達到20%)、適用的流動相范圍廣。利用gpc色譜柱對結(jié)構(gòu)異構(gòu)體進行分離:
gpc色譜柱長期以來被認為是很難對分子量相近的化合物或結(jié)構(gòu)異構(gòu)體進行分離的。但是通過循環(huán)的方法可以輕松的利用gpc色譜柱對以上涉及到的化合物進行分離。
由于h系列色譜柱一般使用氯仿作為流動相,因此對于疏水性樣品溶解性比較好。同時在利用循環(huán)分離過程中,溶劑的消耗量只有逆相色譜的二十分之一左右。
對于結(jié)構(gòu)異構(gòu)體進行分離,我們一般需要10到20個循環(huán)。而8、9產(chǎn)物由于在硅膠體系中展開非常困難,是以往很難進行分離的產(chǎn)物。
這類產(chǎn)物,即便是在gc上也很難利用se-30進行分離。但是使用gpc色譜柱,單次上量300mg,只需要10次循環(huán)就能夠*分離開了。
gpc色譜柱再生:
反方向沖洗色譜柱,沖洗期間不要連接到檢測器,采用二分之一的推薦流速進行沖洗(讓壓力保持在推薦大值以下)。
大多數(shù)gpc色譜柱填料是ps-dvb,選擇一種可以溶解色譜柱中污染物的溶劑。沖洗之前需要檢查溶劑兼容性。對于粘度較大的溶劑,必須采用較低的流速,觀察壓力變化不要超過色譜柱上限。
在某些情況下,根據(jù)污染物情況,清洗的時候可以加入能與有機溶劑相溶的酸性物(甲酸或乙酸)或堿性物(三胺)(檢查ph范圍)。
如果更多的疏水性污染物被保留,推薦提高溫度并使用適當(dāng)?shù)挠袡C溶劑。您需要再一次核對色譜柱允許的大溫度范圍。
如果仔細地進行清洗,gpc色譜柱不會因為溶劑轉(zhuǎn)換而導(dǎo)致性能下降。詳細操作參考說明書。