智能化生物毒性(污染)測試儀特點(diǎn)
dxy-3型智能化生物毒性(污染)測試儀是在dxy-2型 生物毒性(污染)測試儀基礎(chǔ)上改進(jìn)，并加人智能化功能的新型號機(jī)，與上同類產(chǎn)品相當(dāng)，但是，價(jià)格低廉，發(fā)光菌能保證供應(yīng)。
該儀器是基于毒性物質(zhì)對特殊的發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光度的抑制作用而設(shè)計(jì)的，它通過測定發(fā)光細(xì)菌發(fā)光度的變化，量度被測環(huán)境樣品中由重金屬和其它有機(jī)污染物所造成的急性生物毒性。與傳統(tǒng)的魚、蚤和其它水生生物作為生物檢測方法相比，發(fā)光細(xì)菌法簡便、快速、靈敏、適應(yīng)性強(qiáng)、重復(fù)性好、精度高、費(fèi)用低、用途廣，凡有毒化合物、廢水、廢棄物的生物毒性均可測定。因此，它是對受污染環(huán)境的生物毒性檢測進(jìn)行初篩、監(jiān)測較為理想的工具，也是其他領(lǐng)域開拓新的實(shí)驗(yàn)測試方法的新工具。
該儀器可測量和顯示待測液的毒性含量，測量所得數(shù)據(jù)可存儲，可一次存儲10組數(shù)據(jù)，每組數(shù)據(jù)包含3個標(biāo)準(zhǔn)液測量值和3個待檢溶液的測量值，以便查看；同時(shí)，可以上傳到計(jì)算機(jī)，以便分析和*保存。儀器顯示界面由液晶顯示屏提供，儀器的控制輸入由按鍵實(shí)現(xiàn)。
該儀器2型機(jī)為中國環(huán)境監(jiān)測總站監(jiān)制產(chǎn)品。
該儀器測定方法為標(biāo)準(zhǔn)，標(biāo)準(zhǔn)號：“gb/t15441-1995水質(zhì) 急性毒性的測定 發(fā)光細(xì)菌法”由中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出標(biāo)準(zhǔn)文版。儀器標(biāo)準(zhǔn)號：ｑ寧/kts 01-93。經(jīng)過近三十年的不斷開發(fā)，已經(jīng)在環(huán)境科學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)菌學(xué)、生物化學(xué)和臨床檢驗(yàn)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
智能化生物毒性(污染)測試儀儀器用途
測定純化合物(包括有機(jī)分子、無機(jī)金屬離子)的急性毒性。
測定受污染水體(包括工業(yè)排放污水、礦山采礦和冶煉廢水、河水等水系)的急性毒性。
測定受污染土壤、河流和沿海帶底泥的急性毒性。
用于研究有毒元素以及化合物相互之間的相互作用－協(xié)同或拮抗效應(yīng)。
用于慢性反應(yīng)的化學(xué)發(fā)光分析等。
智能化生物毒性(污染)測試儀測試原理
測試原理：總體急性生物毒性。
明亮發(fā)光桿菌之所以發(fā)光，是由于菌的發(fā)光系統(tǒng)發(fā)生了如下反應(yīng)：
基質(zhì)
↓ atp atp atp
還原型* → 黃素(h2) → 細(xì)胞色素 → 02
↓
載氫黃素單核苷酸
熒光酶(電子)↓
02 rch0 rco0h
電子 → fmnh2 → 電子 → fmnh → 光＋fmn＋電子十h2o
↓
ooh
黑暗↓
電子十黃素單核苷酸十h2o2
當(dāng)細(xì)胞活性高，處于積極分裂狀態(tài)時(shí)，細(xì)胞atp含量高，發(fā)光強(qiáng)；休眠細(xì)胞atp含量明顯下降，發(fā)光弱；當(dāng)細(xì)胞死亡，atp立即消失，發(fā)光停止。
處于活性期的發(fā)光菌，當(dāng)加入毒性物質(zhì)(如重金屬離子cu2＋/cd2＋/se4＋/zn2＋/as3＋/pb2＋，農(nóng)藥五氧吩嗪、福美雙，染料對氨基苯甲醚、對硝基鄰甲苯胺，酸、堿等)，菌體就會受抑甚至死亡，體內(nèi)atp含量也會隨之降低甚至消失，發(fā)光度便下降甚至到零。由于毒物濃度與菌體發(fā)光度呈線性負(fù)相關(guān)地變化，因而可據(jù)發(fā)光度確定毒物急性生物毒性。若此毒物知其成份而不知其濃度，則可根據(jù)先前測得的發(fā)光度——毒物濃度關(guān)系曲線(標(biāo)準(zhǔn)曲線)，測定濃度。
智能化生物毒性(污染)測試儀技術(shù)指標(biāo)
1、菌種名稱：明亮發(fā)光桿菌t3小種急性生物毒性測定靈敏度比較
化合物
濃度(毫克/升)
生物毒性測試儀ec50
魚96小時(shí)lc50
cu2＋
3.239
cd2＋
17.19
zn2＋
0.37
pb2＋
82.23
hg2＋
0.126
0.01～0.9
as3＋
0.55
2、測試范圍：0~1999mv(發(fā)光量)
3、測試精度：樣品3次重復(fù)，相對偏差不大于15%
4、靈 敏 度：相當(dāng)或優(yōu)于魚體96小時(shí)培養(yǎng)測定急性
生物毒性試驗(yàn)法，見表(列舉幾例)
5、顯 著 性：樣品濃度與發(fā)光細(xì)菌相對發(fā)光度p<0.05工業(yè)廢水或0.01的水平(純化合物溶液)
6、測試溫度：在室溫20～25℃范圍保持某一恒定值
7、測試時(shí)間：10～20min(單個樣品)
8、結(jié)果表示：樣品ec50值(稀釋百分濃度)或相對發(fā)光度(%)及相當(dāng)?shù)膌v hua gong濃度值(mg/l)
9、供電電源：220v ±l0%
10、尺寸重量：300x240x130mm 5.5kg
該儀器外形、尺寸、重量，若有變化，恕不另行告知。
五、儀器操作
(一) 儀器樣品室：儀器樣品室為單管結(jié)構(gòu)，可放入—只直徑為20毫米的測試樣品管(樣品溶液為5毫升)也可以預(yù)先放入塑料套管，用直徑為12毫米的測試樣品管(樣品溶液為2毫升)。
(二) 樣品溶液的制備、發(fā)光細(xì)菌的復(fù)蘇以及測量順序等：見附錄。
(三) 儀器預(yù)熱：在開始測試前，先確認(rèn)暗室處于關(guān)閉狀態(tài)（具體為暗室向右轉(zhuǎn)至底）再接通儀器電源(這時(shí)面板上應(yīng)是電源指示燈亮與停止指示燈亮)，讓儀器預(yù)熱—刻鐘以上。
請注意！在接通電源前，—定要蓋好樣品室的蓋子，避免光電倍增管曝光，而疲勞受損。
(四) 功能按鍵：
儀器控制由按鍵實(shí)現(xiàn)：[上/左]、[下/右]、[取消/返回]、[測量]、[存儲]、[確定]。
儀器開機(jī)后進(jìn)入主界面，主界面有5個功能選項(xiàng)：[測量]、[校正]、[設(shè)置]、[查看]、[上傳]。
通過[上/左]、[下/右]選擇要進(jìn)入的功能選項(xiàng)，選中的功能反白顯示，按[確定]后進(jìn)入相應(yīng)的菜單。
1、測量：
進(jìn)入[測量]后，設(shè)置有兩個選項(xiàng)：
①、使用默認(rèn)操作員編號進(jìn)入測量（編號全為1）；
②、使用手動輸入，設(shè)置操作員編號，有三組操作員，通過[上/左]、[下/右]按鍵設(shè)置，按[確定]進(jìn)入測量界面。
測量界面分三個部分：
①、zui左邊顯示項(xiàng)目號、設(shè)置好的操作員編號、時(shí)間和日期；
②、上面顯示測量值，右上腳顯示溫度；
③、中間顯示測量結(jié)果，每屏顯示兩組測量結(jié)果；
下面顯示菜單，共四個菜單：[測量]、[上翻]、[下翻]、[返回]主界面。
[測量] 菜單是用于記錄和修改已記錄的穩(wěn)定的測量值的。當(dāng)菜單處于[測量]時(shí)，按[確定]鍵，會將測量值記錄下來，并在屏幕中間顯示出來；按[取消]鍵，會將zui后記錄的一個數(shù)據(jù)清除，重新測量；按[上翻]、[下翻]查看已記錄的數(shù)據(jù)。一個項(xiàng)目包含10組數(shù)據(jù)，每屏只能顯示2組數(shù)據(jù)。
測量完畢后如果需要保存數(shù)據(jù)的話，請按[儲存]鍵，屏幕會給出一個界面用于選擇是否保存當(dāng)前項(xiàng)目所測數(shù)據(jù)，保存是請您記住系統(tǒng)自動遞增，生成的項(xiàng)目編號，以便你查閱數(shù)據(jù)。
注意：測量時(shí)記錄的數(shù)據(jù)只是緩存，沒有存入rom當(dāng)中，如果測量完畢后的數(shù)據(jù)需要存儲的話，請務(wù)必按[存儲]鍵將數(shù)據(jù)保存。
2、校正：
進(jìn)入[校正]后，有三個功能菜單：[零點(diǎn)校正]、[時(shí)間校正]、[返回]主界面。
通過[上/左]、[下/右]、[確定]、[取消/返回]按鍵進(jìn)行具體操作，反白顯示的為當(dāng)前選中的操作。
3、設(shè)置：
進(jìn)入[設(shè)置]后，有五個功能菜單：[背光保持時(shí)間]、[聲音設(shè)置]、[倍率] 、[自動取樣時(shí)間]、[返回]主界面。
[背光保持時(shí)間]包括：15s、30s、60s、常亮；
[聲音設(shè)置]包括：開和關(guān)提示音；
[倍率]包括：*1、*2、*3、*4、*5 以此放大發(fā)光菌的發(fā)光量。
[自動取樣時(shí)間]包括：5s、10s、15s、手動；
選擇[自動取樣時(shí)間]后，在測量時(shí)，到達(dá)設(shè)定的時(shí)間后，會自動記錄測量結(jié)果。
4、查看：
進(jìn)入[查看]后，會提示輸入項(xiàng)目號(左上腳顯示的項(xiàng)目號)，輸入項(xiàng)目號后就會進(jìn)入界面，可以查看當(dāng)時(shí)測量后保存的數(shù)據(jù)，界面跟測量界面相同，顯示此項(xiàng)目測量的時(shí)間、日期、溫度、操作員編號、測量的數(shù)據(jù)，通過[上/左]、[下/右]按鍵上翻、下翻數(shù)據(jù)。按[返回]鍵退出查看，返回主界面。
5、上傳：
進(jìn)入[上傳]后，會提示單一上傳或者選擇整片上傳，將rom里面的數(shù)據(jù)全部上傳。
(五) 樣品測量：
1、向上拔出樣品室的蓋子(注意！拔出前，面板上應(yīng)是停止指示燈亮)，然后將盛有待測樣品溶液的瓶子放入樣品室，蓋好蓋子。
2、抓住蓋子，依逆時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)(這時(shí)面板上停止指示燈熄滅，測量指示燈亮)，約1-2秒，則可讀取樣品溶液的測定數(shù)據(jù)。
3、抓住蓋子按順時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)，回到原處(面板上測量指示燈熄滅，停止指示燈亮)，這時(shí)，才可以向上拔出蓋子，取出已測過的樣品。此后，可作如下處理：
①、還有待測樣品，再取一瓶放入，蓋好蓋子，然后按上述步驟進(jìn)行測量。
②、因樣品需要進(jìn)一步處理，不能馬上測量，可以蓋上蓋子等待。
③、整批樣品已測試完畢，蓋好蓋子，將儀器電源切斷。
(六) 有色樣品液的測量：
對有色被測液，若用常規(guī)方法測會有干擾，因此需用下述方法進(jìn)行校正。具體步驟如下：
1、從儀器樣品室取出黑色塑料管套。
2、取一只2m1管(即12毫米測試樣品管)，加3% naci溶液2ml，將該管放進(jìn)一只裝有適量3% nacl溶液的5ml管(即20毫米的測試樣品管)內(nèi)，并使外管與內(nèi)管的3% nacl溶液面平齊，此作ck管。
3、另取一只2ml管，加3% nacl溶液2ml，放入另一只裝有適量有色待測樣品液的5ml管內(nèi)，要使外管與內(nèi)管的3% nacl溶液面平齊，此作ckc管。
4、于ck和ckc二管的內(nèi)管中同時(shí)加復(fù)蘇發(fā)光菌液10μ(注意：必須是本批樣品測定所用同一瓶復(fù)蘇菌液)，立即記時(shí)到秒，等反應(yīng)滿15分鐘，迅即放入儀器樣品室，測定二只帶有內(nèi)管的5ml管的發(fā)光度。分別記下發(fā)光度l1(ck管)和l2(ckc管)。
5、計(jì)算因顏色引起的發(fā)光度校正值△l＝ll-l2。
6、測試帶色樣品管及其ck管(加3% nacl溶液)的發(fā)光量。
但是，所有ck管測得之發(fā)光度均須減去校正值△l后才能作為ck發(fā)光度。
六、結(jié)果處理
數(shù)據(jù)的處理：見附一中之(五)測試數(shù)據(jù)處理
說明：當(dāng)在一次系列樣品的測量過程中，“輸出幅度選擇”開關(guān)所處的位置有變動，則需換算成某—檔次的值，然后才進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。“xl”檔與其它檔(“xn”檔)的關(guān)系如下：
xn
xl ＝ ---- 或 xn ＝ xl·n n
式中：n--------為“輸出幅度選擇”開關(guān)所處的位置；
x1 ，xn --為“輸出幅度選擇”開關(guān)處于“xl”，“xn”檔時(shí)，數(shù)字表上的讀數(shù)。
七、分級標(biāo)準(zhǔn)
根據(jù)國外有關(guān)資料及國內(nèi)的一些實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，擬定如下水質(zhì)急性毒性的分級標(biāo)準(zhǔn)，供參考。
水質(zhì)急性毒性的分級標(biāo)準(zhǔn)
毒性等級
相對抑光率%
hg（毫克/升）
毒性級別
i
<30
<0.07
低毒
ii
30-50
0.07-0.09
中毒
iii
50-70
0.09-0.12
重毒
iv
70-100
0.12-0.16
高毒
v
100
>0.16
劇毒
注：相對抑光率%＝100%－相對發(fā)光度%
八、注意事項(xiàng)
(一) 儀器要水平放置于工作臺上，并注意，千萬不要放置在溫度高、濕度大及電磁干擾大的地方。
(二) 當(dāng)儀器不進(jìn)行測試時(shí)，—定要蓋上樣品室的蓋子，防止灰塵進(jìn)入及光電倍增管曝光；在測量時(shí)，要避免以強(qiáng)光照射光電倍增管，而產(chǎn)生疲勞現(xiàn)象。
(三) 在給各測試管加復(fù)蘇菌液后，蓋上瓶塞，用手顛倒5次；但是，在放回原位后，要拔去瓶塞?。?！
(四) 請?zhí)貏e注意：嚴(yán)防測試的樣品溶液漏在樣品室內(nèi)。如發(fā)現(xiàn)樣品管外壁已附著樣品液時(shí)，一定要先擦干凈后，再放入樣品室，避免樣品室產(chǎn)生銹蝕，致旋轉(zhuǎn)不自如或轉(zhuǎn)不動。若樣品室內(nèi)已沾附著樣品液時(shí)，馬上用濾紙吸干，并用稀機(jī)油在沾附處擦洗—下。
(五) 發(fā)光細(xì)菌的活性及使用菌液量的準(zhǔn)確性都將對測量產(chǎn)生很大的影響，因此務(wù)必正確的操作。
(六) 當(dāng)發(fā)現(xiàn)測量結(jié)果異常時(shí)，要認(rèn)真檢查分析，找出原因，并加以解決：
1、操作的環(huán)境溫度、樣品溫度是否控制在200c；
2、菌種的復(fù)蘇情況，是否均勻；
3、用于測試的管子是否清洗干凈；
4、用10μl微量注射器吸取復(fù)蘇菌液時(shí)是否有小氣泡；
5、樣品與菌液的反應(yīng)時(shí)間是否準(zhǔn)確到秒；
6、當(dāng)天使用的菌種復(fù)蘇液只能在當(dāng)天使用。
(七) 請注意：
1、儀器處于“停”狀態(tài)，旋轉(zhuǎn)“調(diào)零”，數(shù)字表上能出現(xiàn)正負(fù)值均勻變化，調(diào)節(jié)“調(diào)零”使顯示“0”，零點(diǎn)應(yīng)穩(wěn)定；
轉(zhuǎn)動樣品室的蓋子，讓儀器處于“測”狀態(tài)，然后慢慢拔起蓋子，使它與樣品室間有一小縫，讓室內(nèi)光線射入樣品室，數(shù)字表有顯示值，且隨隙縫大小而變化。蓋好蓋子，轉(zhuǎn)回原位，應(yīng)顯“0”。
2、發(fā)光菌液在儀器中的顯示值符合規(guī)定要求，衰減情況正常。
以上兩項(xiàng)正常，出現(xiàn)測量結(jié)果異常，則屬于操作不嚴(yán)格、不規(guī)范，要認(rèn)真重做一遍。
(八) 如果發(fā)光細(xì)菌不好，則更換發(fā)光菌凍干粉。當(dāng)判定是儀器的故障，請發(fā)送我所檢修，千萬不要自拆。
(九) 儀器自提貨之日起，因元器件的質(zhì)量造成的故障，免費(fèi)包修一年；該儀器長年保修