近年來，抗病毒的yao物在動(dòng)物上的濫用現(xiàn)象頻繁發(fā)生，可直接導(dǎo)致病毒耐藥性的產(chǎn)生，嚴(yán)重影響藥物對(duì)人的治療作用，對(duì)人類健康構(gòu)成了潛在威脅。
因此，我國*明令禁止動(dòng)物使用*等抗病毒yao物，并且出臺(tái)了動(dòng)物源食品中抗病毒yao物的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，切實(shí)保障動(dòng)物源食品的安全。
大曹技術(shù)中心參考《出口動(dòng)物源食品中*殘留量的測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》（sn/t 4519-2016）標(biāo)準(zhǔn)，在lc-ms上建立了*標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè)方法。
sn/t 4519-2016 規(guī)定了色譜柱類型
那么問題來了？
什么是兩性離子型親水相互作用色譜柱？
跟一般的親水色譜柱有什么區(qū)別呢？
*檢測(cè)為什么使用這款色譜柱？
01
兩性離子型親水相互作用色譜柱
兩性離子型親水相互作用色譜柱，是固定相鍵合了兩性離子的親水型色譜柱。
然而，目前市面上大多數(shù)的親水性色譜柱（hilic），通常鍵合的中性或者非兩性的帶電基團(tuán)，對(duì)極性化合物保留能力不夠，或容易產(chǎn)生靜電力吸附導(dǎo)致拖尾。
大阪曹達(dá)獨(dú)立研發(fā)的兩性離子型親水色譜柱——pc hilic，鍵合為pc（磷酸*）基團(tuán)，它是構(gòu)成細(xì)胞膜的成分，擁有高親水性和生體適應(yīng)性。
pc hilic 鍵合相結(jié)構(gòu)
pc兩性離子鍵合相的優(yōu)勢(shì)：
1、形成穩(wěn)定的“富水層”，對(duì)極性物質(zhì)保留能力更好；
2、兩性離子型鍵合相對(duì)化合物額外的靜電力吸附少，峰形更加尖銳；
3、低濃度的緩沖鹽調(diào)節(jié)，即可實(shí)現(xiàn)分離效果的提升。
好了，話不多說，咱們來看看*的檢測(cè)方法吧。如果您想了解更多pc hilic & capcell core pc的內(nèi)容，請(qǐng)直接閱讀文末內(nèi)容。
02
sn/t 4519-2016*的分析方法
首先，使用核殼型高柱效兩性離子鍵合親水性相互作用色譜柱capcell core pc s2.7; 2.1mm i.d.×150mm，在5 mmol/l乙酸銨（0.2%甲酸）-乙腈條件下進(jìn)行分析，結(jié)果如圖1所示，*在hilic模式下，能夠獲得良好保留與良好峰形，出峰時(shí)間為3.57min，總分析時(shí)間9.5min。
圖1 sn/t條件下lc-ms分析結(jié)果
hplc conditions
色譜柱：capcell core pc s2.7; 2.1mm i.d.×150mm
流動(dòng)相：a:5mmol/l乙酸銨（0.2%甲酸） b:乙腈
b% 95%(0min) ->95%(2min) ->70%(4min) ->40%(5min) ->95%(6min) ->95%(10min)
流 速：0.4ml/min
溫 度：30°c
檢 測(cè)：qtrap 5500; esi; positive; mrm
進(jìn)樣量：2 µl
濃 度：2 ng/ml（水溶后使用初始比例流動(dòng)相稀釋）
03
*的lc-ms快速分析方法
由于capcell core pc色譜柱能夠?qū)?得到良好保留結(jié)果，也可以使用更短色譜柱以獲得更快速的分析結(jié)果。我們重新優(yōu)化梯度后，得到結(jié)果如圖2所示，出峰時(shí)間縮短為0.83min，由于hilic型色譜柱相對(duì)平衡較慢，因此設(shè)置2min后平衡時(shí)間，總體分析時(shí)間縮短為4min。
圖2 *lc-ms快速分析結(jié)果
hplc conditions
色譜柱：capcell core pc s2.7; 2.1mm i.d.×50mm
流動(dòng)相：a:5mmol/l乙酸銨（0.2%甲酸） b:乙腈
b% 95%(0min) ->95%(0.5min) ->50%(2min) ->95%(2.1min) ->95%(4min)
流 速：0.5ml/min
溫 度：30°c
檢 測(cè)：qtrap 5500; esi; positive; mrm
進(jìn)樣量：2 µl
濃 度：2 ng/ml（水溶后使用初始比例流動(dòng)相稀釋
綜上所述，使用capcell core pc s2.7（兩性離子親水性相互作用）色譜柱能夠完成《出口動(dòng)物源食品中*殘留量的測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》（sn/t 4519-2016）中*的良好保留與檢測(cè)，柱長(zhǎng)可根據(jù)實(shí)際分析需要進(jìn)行選擇。
pc hilic & capcell core pc
pc hilic是在硅膠基材表面以pc基團(tuán)進(jìn)行修飾，實(shí)現(xiàn)了適用于hilic色譜柱的超親水性填料的制造。與普通硅膠色譜柱相比，pc hilic的親水性更強(qiáng)，對(duì)極性化合物核酸堿基的保留更強(qiáng)。
pc hilic色譜柱vs其他公司hilic色譜柱：在酸性條件下對(duì)極性化合物核酸堿基進(jìn)行分析，因pc hilic具有*親水性，對(duì)核酸堿基得到了良好保留，有利于分離。另外，理論塔板數(shù)也很高，峰形也很尖銳。
色譜柱：pc hilic s5; 4.6 mm i.d. × 250 mm
流動(dòng)相：10 mmol/l hcoonh4 (ph 3.5) / ch3cn = 10 / 90
流 速：1.0 ml/min
溫 度：40℃
檢 測(cè)：uv 254 nm
樣 品：①萘 ②胸腺嘧啶 ③腺嘌呤 ④胞核嘧啶
capcell core pcvspc hilic：出峰更快，具有核-殼型色譜柱柱效高的特點(diǎn)。
【液相條件】
流動(dòng)相：10 mmol/l甲酸銨 / 乙腈 = 10 / 90
流 速：400 μl/min
溫 度：40℃
檢測(cè)器：uv 254 nm
進(jìn)樣量：1 μl
樣 品：1. 胸腺嘧啶(5 ppm) 2. *(5 ppm) 3. 腺嘌呤(5 ppm) 4. 胞嘧啶(5 ppm) 5. *(5 ppm)
因此，capcell core pc s2.7是分析強(qiáng)親水性化合物的核-殼型hilic色譜柱。