特征:
evagreen® dye – 信號比 sybr® green 更好,更安全、更環(huán)保
cheetah™ hotstart taq – 在 95°c 下兩分鐘后全激活,以實現(xiàn)快速循環(huán)方案
配備 2 色跟蹤系統(tǒng),有助于發(fā)現(xiàn)移液錯誤,節(jié)省時間、試劑、dna 樣本和 $$$
可以不使用 rox 被動染料,使用單獨的 rox 管,或與 rox 預(yù)混合(高濃度或低濃度)
我們的forget-me-not™ evagreen® qpcr 主混合物是熱啟動 evagreen® 基于染料的主混合物,用于實時 pcr 應(yīng)用和 dna 熔解曲線分析。這些預(yù)混液可代替任何 sybr® green 染料基預(yù)混液。 forget-me-not™ evagreen® qpcr 主混合物含有低濃度的惰性藍色染料,使您可以輕松看到含有主混合物的孔。
主混合物可不含 rox 被動染料,帶有單獨的 rox 管,或與 rox 預(yù)混合(高濃度或低濃度)。試劑盒配有 2 色跟蹤系統(tǒng),其中包括 dna 模板緩沖液(一種深藍色染料),當與模板混合時,添加模板后會將反應(yīng)從淺藍色變?yōu)樯钏{色(圖 1,左)。 2 色跟蹤系統(tǒng)可以防止移液錯誤,避免浪費時間、試劑和珍貴的 dna 樣本。
圖 1. 含有淺藍色染料的 forget-me-not™ evagreen® master mix(2 色追蹤)在添加含有深藍色模板緩沖液的模板之前(左)和之后(右)。
圖 2. forget-me-not™evagreen® qpcr 主混合物的性能與其他基于染料的 pcr 主混合物一樣好或更好,具有出色的亮度和靈敏度。evagreen® 染料一種dna 結(jié)合染料,具有非常適合 qpcr 和高分辨率 melting® (hrm) 分析*的功能。 evagreen® 染料通過新穎的“按需釋放”機制與 dsdna 結(jié)合,允許在 qpcr 中使用相對較高的染料濃度,而不會產(chǎn)生 pcr 抑制(mao, et al. 2007. bmc biotech. 7, 76-91) 。
evagreen® 染料的其安全性非常好。 dna 結(jié)合染料本質(zhì)上是危險的,因為它們有可能引起突變??紤]到這一點,biotium 的科學(xué)家設(shè)計了 evagreen® 染料,使其無法穿過細胞膜,從而防止染料與活細胞中的基因組 dna 接觸。所有其他商業(yè) pcr 染料只需幾分鐘即可進入細胞。例如,sybr® green i 已被證明比溴化乙錠(一種的誘變劑)具有更大的環(huán)境毒性(ohta, et al. 2001. mut. res. 492, 91-97)。獨立實驗室已證實 evagreen 染料不會導(dǎo)致突變、無細胞毒性,并且對水生生物來說是安全的,可以直接丟棄在排水溝中。
基于 evagreen® 的預(yù)混液的另一個好處是,您可以通過凝膠電泳分析 pcr 產(chǎn)物,而無需在上樣緩沖液或凝膠中添加另一種 dna 結(jié)合染料。主混合物中的 evagreen® 染料可充當 dna 預(yù)染色劑,允許在電泳后直接觀察 dna 帶。
cheetah™ hotstart taqcheetah™ hotstart taq dna 聚合酶是 biotium 專有的化學(xué)修飾熱啟動 dna 聚合酶。 cheetah™ taq 在室溫下全失活,在 95°c 2 分鐘后全激活,使其特別適合快速循環(huán) pcr 方案。
qpcr 預(yù)混液
forget-me-not™ 通用探針 qpcr master mix 是一款高性能產(chǎn)品,適用于基于熒光探針的 pcr 應(yīng)用,包括定量和 snp 基因分型。該試劑盒適用于所有基于熒光探針的技術(shù),包括水解探針(例如 taqman® 和雙標記 bhq® 探針)和位移探針(例如分子信標)。 forget-me-not™ 通用探針 qpcr master mix 在單重和多重反應(yīng)中顯示出出色的結(jié)果一致性,具有廣泛的儀器兼容性,并且可用于標準和快速方案。如果您的儀器需要 rox 參考染料,rox 還提供單獨的套件。
該套件包括 40x forget-me-not™ 跟蹤緩沖液,其中含有惰性藍色染料。您可以選擇將跟蹤緩沖液添加到預(yù)混液、dna 模板中,或者在反應(yīng)中不使用跟蹤緩沖液。在主混合物中添加跟蹤緩沖液可以讓您輕松區(qū)分含有反應(yīng)混合物的孔和空孔。另一方面,將跟蹤緩沖液添加到 dna 模板樣品中可讓您在設(shè)置 pcr 反應(yīng)時跟蹤已添加模板的反應(yīng)。
圖 3.勿忘我通用探針預(yù)混液對于多重探針 pcr 反應(yīng)效果非常好。