胎牛血清(fetal bovine serum,fbs)是在生物醫(yī)學(xué)研究和細胞培養(yǎng)中廣泛使用的重要生物制品,它含有豐富的生長因子、蛋白質(zhì)和其他生物分子,對細胞生長和增殖起著至關(guān)重要的作用。制備胎牛血清是一個復(fù)雜的過程,通常由專業(yè)的生物制品公司進行,以確保其質(zhì)量和純度。在本文中,我們將介紹一般的胎牛血清制備過程的主要步驟。
步驟1:采集胎牛血液
制備胎牛血清的第一步是采集胎牛的血液。這需要在專業(yè)場所進行,確保采集的胎牛來自健康且受監(jiān)控的牧場。采集血液需要遵循倫理和動物福利的法規(guī)和標準。確保供體是5-8月齡的牛胚胎。
步驟2:血液分離
采集的胎牛血液會經(jīng)過離心分離,將血漿與血細胞分開。血漿中包含了胎牛血清的大部分有利于細胞體外生長和繁殖的營養(yǎng)成分,如蛋白質(zhì)、生長因子和激素。
步驟3:過濾和清理
分離后的血漿會經(jīng)過過濾等步驟,以去除殘留的細胞碎片和顆粒物。這有助于提高血清的質(zhì)量和純度,確保它不含有微生物或其他污染物。
步驟4:滅菌
胎牛血清需要進行滅菌處理,以確保其中不含有微生物污染。常見的滅菌方法包括過濾、輻照(細胞治療專用)等,這些方法可以有效地殺滅細菌、病毒和其他微生物。
以ausbian進口特級胎牛血清為例:將經(jīng)過初步檢測合格的很多供體胎牛的粗血清,混合在一起,在低溫條件下,經(jīng)七次加壓過濾,最后三次為0.1 µm無菌過濾處理,得到淺黃色,澄清,稍粘稠液體。同一批次血清質(zhì)量上基本無差異。不同廠家一個批次產(chǎn)量差異較大,從100升到2000升不等。批次大,更利于試驗的穩(wěn)定和連續(xù)的可參照性。
步驟5:質(zhì)量控制
制備后的胎牛血清通常會經(jīng)過一系列的質(zhì)量控制測試,包括檢測其對細胞培養(yǎng)的兼容性、生長因子和激素水平,以確保其質(zhì)量符合要求。這些測試有助于驗證血清的質(zhì)量和生物活性。
步驟6:分裝和儲存
制備后的胎牛血清會被分裝到小瓶或小管中,并嚴格冷凍保存。這有助于防止血清中的成分降解或受到污染。儲存溫度通常為零下20攝氏度或更低,以確保血清的長期保存穩(wěn)定性。