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如何選擇合適你實驗需要的抗體?

發(fā)布時間:2024-04-18
抗體種類繁多,品牌眾 多,技術參數(shù)不一,價格和質(zhì)量更是相差甚大,如何購買到高質(zhì)量價格合適的抗體,并準確地做出我們想要的結(jié)果,其中有很多細節(jié)需要注意。 一、怎樣選擇適合你實驗需要的抗體?1. 一抗選擇要點(1)確定抗體的名字,注意中英文名字、它名、亞型等信息。(2)確定你的實驗類型,elisa,wb,ihc,icc,還是facs。一般抗體的說明書都會列出該抗體經(jīng)驗證過適用于何種實驗的類型,如果抗體說明 書沒有提及的應用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應用類型,而僅是說明尚未經(jīng)過此種實驗驗證,請根據(jù)說明書列出的已驗證的類型來選擇適合你實驗的 抗體。(3)確定實驗樣本的種屬,human,mouse,還是rat。一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗驗證過適用于何種物種實驗,請根據(jù)說明書列出已驗證的種屬來選擇適合你實驗的抗體。(4)樣本蛋白的結(jié)構性質(zhì)。了解樣本蛋白的結(jié)構性質(zhì)有助于選擇zui合適的抗體,待測樣本蛋白的結(jié)構域和樣本在提取和處理過程中是否會變性,蛋白空間構象的改變,會影響抗體的免疫親和反應。
(5)單多克隆抗體的選擇。市面上的抗體還是以多克隆抗體為主,一般單克隆抗體特異性強,但親和力相對小,檢測抗原靈敏度相對就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強,靈敏度高,但易出現(xiàn)非特異性染色(可以通過封閉等避免)。
2. 二抗選擇要點(1)種屬來源。主要根據(jù)一抗種屬來源來決定購買二抗來源,如一抗是小鼠來源,那二抗就買抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。(2)標記物的選擇。有hrp、biotin、熒光素等標記物。一般sp三步法二抗選擇biotin標記的二抗,以與后面的sp結(jié)合反應,而免疫熒光染色就需要購買不同熒光素標記的二抗,如羅丹明、fitc、cy3等常用熒光素。 二、抗體的穩(wěn)定性1. 抗體的穩(wěn)定性是自然界長期進化的結(jié)果。抗體是免疫系統(tǒng)中zui重要的分子之一,其穩(wěn)定性是自然進化篩選的結(jié)果。在眾多物種中,抗體分子形成了保守而穩(wěn)定的結(jié)構。2. 抗體分子的高tm值。在室溫下,甚至短時間溫度達到50-60℃,抗體分子都能維持正確折疊,保持應有的活性。3. 抗體的純度。采用先進的抗體純化技術,確??贵w產(chǎn)品的高純度,保障其抗體產(chǎn)品的穩(wěn)定性。4. 抗體的濃度。高濃度的抗體產(chǎn)品可減少容器表面吸附造成的物質(zhì)損失,高濃度的抗體穩(wěn)定性更好,抗體產(chǎn)品中93%的濃度大于0.5mg/ml。 三、怎樣確定抗體購買渠道和品牌?
東莞市景源實驗科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、全球營銷為一體的綜合型高科技企業(yè),憑借良好的信用、可靠的質(zhì)量快捷的物流與專業(yè)的服務,在行業(yè)內(nèi)享有很高的聲譽?,F(xiàn)時代理以及代理的全球品牌已有40多個,業(yè)務遍及中國及海外多個國家和地區(qū)。產(chǎn)品包括:標準品對照品、參比制劑、高純有機試劑、無機試劑、生化試劑、分析試劑、金屬有機催化劑以及實驗全儀器、耗材等600,000余種產(chǎn)品,務求全面滿足客戶各種實驗檢測需求。
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