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花葉香蒲的組織培養(yǎng)和植株再生

發(fā)布時(shí)間:2023-10-25
自然或人工濕地、濕地生態(tài)工程是近年來迅速發(fā)展起來的一種污水處理技術(shù),其具有能耗低、高效、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn),應(yīng)用前景廣泛[1][2]。其關(guān)鍵在于找到合適的超富集植物。香蒲類植物生活在淺水、濕地或沼澤地區(qū),分布范圍廣,生長(zhǎng)旺盛,在維持水生生態(tài)系統(tǒng)的良性循環(huán)中有著重要的作用,它能富集水體中的鉛、硒、鋅、銅等多種有害重金屬[3][4][5],對(duì)氮磷也有一定的吸收作用[5],能有效減輕水體的營(yíng)養(yǎng)化富集現(xiàn)象,對(duì)保持水生生態(tài)系統(tǒng)的平衡,改良水生生態(tài)環(huán)境有著重要的作用。
花葉香蒲是一種集觀賞性與實(shí)用性于一身的香蒲新品種,它可廣泛應(yīng)用于各種人工或自然水體景觀中,既可提高水體景觀的觀賞價(jià)值,又能起到調(diào)節(jié)水體自身生態(tài)環(huán)境的作用。
花葉香蒲的常規(guī)繁殖以分株繁殖方式為主,長(zhǎng)期大量的分株繁殖常常會(huì)導(dǎo)致種性的退化,從而影響植物的生活力和觀賞價(jià)值,但關(guān)于花葉香蒲的其他繁殖方法尚未見報(bào)道。植物的試管離體繁殖能在一定程度上復(fù)壯植物的種性,本文就花葉香蒲的離體繁殖作一個(gè)初步的探討,以期為花葉香蒲的大量應(yīng)用提供優(yōu)質(zhì)種苗保證。
1 材料與方法
取花葉香蒲的莖尖和幼嫩心葉,經(jīng)千分之一升汞常規(guī)消毒后,無菌水沖洗干凈后,將莖尖逐層剝?nèi)ト~片至5mm左右大小,心葉取基部,切成1.0cm×1.0cm大小方塊,分別接種于各種待試培養(yǎng)基上,置于光環(huán)境和暗環(huán)境中培養(yǎng)。
培養(yǎng)環(huán)境溫度為25℃,光培養(yǎng)光照時(shí)間10小時(shí),光照強(qiáng)度2500lx。
2 結(jié)果與討論
2.1 莖尖培養(yǎng)
莖尖在光照培養(yǎng)條件下,6天后開始出現(xiàn)褐化現(xiàn)象,12天可見心葉開始抽生,呈淡黃色,部分莖尖基部開始腫大,18天開始抽生第2片小葉,苗高達(dá)3.5cm,在ms+6-ba0.5+naa0.1和ms+6-ba0.5+naa0.1。ms+6-a0.5+naa0.1培養(yǎng)基上部分莖尖基部有愈傷發(fā)生,呈黃色,較疏松,25天開始抽生第三片小葉,愈傷長(zhǎng)大,無分化;暗培養(yǎng)條件下,8天后開始出現(xiàn)褐化現(xiàn)象,12天可見心葉萌動(dòng),15天個(gè)別基部有腫大現(xiàn)象,21天抽生第二片小葉,25天在ms+6-ba0.5+naa0.1培養(yǎng)基上部分分化苗有根發(fā)生。
從表1可以看到,在附加激素6-ba為0.5~1.5mg/l或kt為0.5~2.0mg/l和naa為0.1~0.5mg/l范圍內(nèi),花葉香蒲的莖尖都能成活并正常生長(zhǎng)成苗。當(dāng)6-ba濃度達(dá)2.0mg/l,有玻璃化苗發(fā)生,而使用kt時(shí),未見玻璃化現(xiàn)象。
2.2 葉片培養(yǎng)
從表2可以看到,花葉香蒲葉片培養(yǎng)的褐化情況較為嚴(yán)重,分化率低;使用kt作為附加細(xì)胞分裂素和在暗培養(yǎng)的條件下,可部分減輕褐化現(xiàn)象的發(fā)生。過高的激素水平雖可促使愈傷的發(fā)生,但不利于愈傷的生長(zhǎng),甚至?xí)?dǎo)致愈傷的褐化死亡,而在低水平激素條件下,愈傷生長(zhǎng)緩慢。
綜上所述,可見花葉香蒲的離體繁殖材料以莖尖為好,在添加適量外源生長(zhǎng)激素的情況下可一次成苗,在添加6-ba為0.5~1.5mg/l或kt0.5~2.0mg/l和naa0.1~1.0mg/l的ms培養(yǎng)基上,離體培養(yǎng)均可獲得成功,光照條件能促進(jìn)莖尖的生長(zhǎng)發(fā)育,但會(huì)加重褐化現(xiàn)象的發(fā)生。
表1 不同培養(yǎng)條件下花葉香蒲莖尖培養(yǎng)的分化情況
培養(yǎng)條件
附加激素配比
材料數(shù)
污染數(shù)
褐化(死亡)數(shù)
分化數(shù)
分化率(%)
備注
光培養(yǎng)
6-ba2.0+naa1.0
15
2
6
4
57.1
有玻璃化苗發(fā)生
6-ba1.5+naa0.5
15
0
3
6
50.0
6-ba1.0+naa0.2
15
2
4
8
72.3
6-ba0.5+naa0.1
15
5
2
4
50.0
kt2.0+naa1.0
15
2
0
9
55.6
kt1.5+naa0.5
15
5
2
5
60.0
kt1.0+naa0.2
15
3
1
6
62.5
kt0.5+naa0.1
15
2
1
3
55.6
暗培養(yǎng)
6-ba2.0+naa1.0
15
1
4
8
25.0
6-ba1.5+naa0.5
15
1
3
6
80.0
6-ba1.0+naa0.2
15
0
3
7
58.3
6-ba0.5+naa0.1
15
4
0
6
55.6
有生根現(xiàn)象發(fā)生
表2 不同培養(yǎng)條件下花葉香蒲葉片培養(yǎng)的分化情況
培養(yǎng)條件
附加激素配比
材料數(shù)
污染數(shù)
褐化(死亡)數(shù)
分化數(shù)
分化率(%)
備注
光培養(yǎng)
6-ba1.0+naa0.5
30
12
15
0
0
6-ba0.5+naa0.5
30
9
13
1
12.5
6-ba0.1+naa0.2
30
3
13
4
28.5
6-ba0.1+naa0.1
30
7
15
3
37.5
分化愈傷生長(zhǎng)緩慢
kt1.0+naa0.5
30
7
12
2
18.2
kt0.5+naa0.5
30
3
8
6
31.6
kt0.1+naa0.2
30
3
11
3
18.8
分化愈傷生長(zhǎng)緩慢
kt0.1+naa0.1
30
5
5
1
5.0
分化愈傷生長(zhǎng)緩慢
暗培養(yǎng)
6-ba0.1+naa0.5
30
6
14
3
33.3
培養(yǎng)后期愈傷部分死亡
6-ba0.5+naa0.5
30
7
14
0
0
6-ba0.1+naa0.2
30
8
11
0
0
6-ba0.1+naa0.1
30
5
17
2
25.0
分化愈傷生長(zhǎng)緩慢
此外,本文只對(duì)花葉香蒲離體培養(yǎng)作了一個(gè)初步的探討,關(guān)于愈傷的培養(yǎng)狀況、引起褐化的原因及解決方法等其它方面有待作進(jìn)一步研究。
作者:林 鴻1 劉錦蘭2 張雄勝1 潘宜平1
(1. 武漢園林科學(xué)研究所 430081 2. 湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院 430074)
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