組培室設(shè)計(jì)規(guī)劃之滅菌室布局
滅菌室最好和配制培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室相鄰或盡量靠近,因配制好的培養(yǎng)基和一些器皿需要盡快進(jìn)行高溫高壓滅菌,如果兩處相距太遠(yuǎn)會(huì)給工作帶來諸多不便。滅菌室面積可小一些,其內(nèi)除放滅菌鍋外最好還有臨時(shí)存放培養(yǎng)基、培養(yǎng)器皿的架子,也應(yīng)有自來水裝置。滅菌室可根據(jù)滅菌鍋的多少,工作量的大小來確定面積,要求房間能有較好的通風(fēng)散熱條件,且要配備專門的電源線路,因?yàn)殡姛釡缇伒暮碾娏亢艽?,普通的照明線路或動(dòng)力線很難承受。滅菌鍋是一種高溫高壓容器,操作人員應(yīng)有一定的專業(yè)技術(shù)訓(xùn)練才能操作,且在操作過程中一定要認(rèn)真、負(fù)責(zé)、細(xì)心,及時(shí)檢查核對(duì)鍋內(nèi)的水位、鍋上的壓力表、放氣閥、安全閥等,看看是否正常,切莫違規(guī)操作,釀成事故。在使用一段時(shí)間之后,最好請(qǐng)有關(guān)質(zhì)檢部門核查校正一下滅菌鍋上的壓力表。
組培室設(shè)計(jì)規(guī)劃之生產(chǎn)規(guī)模的確定
采用組培快繁技術(shù)進(jìn)行植物種苗的工廠化生產(chǎn),包括入選品種外植體的篩選及獲取、外植體滅菌誘導(dǎo)培養(yǎng)、無菌材料繁殖、繼代擴(kuò)繁、單株生根、出瓶過度煉苗、包裝進(jìn)入市場(chǎng)等工藝程序。由于組培苗生產(chǎn)從進(jìn)瓶到出瓶都是在無菌條件下完成,故考慮建設(shè)一個(gè)組培工廠生產(chǎn)規(guī)模時(shí)通常以購(gòu)買多少無菌工作臺(tái)來衡量,原則上,根據(jù)繁殖品種的不同一個(gè)無菌工作臺(tái)可按年生產(chǎn)15-20萬苗計(jì)算。如規(guī)劃一個(gè)生產(chǎn)量達(dá)500萬株的組培室,需設(shè)25-30個(gè)無菌操作位置。另外一種計(jì)算方法是,根據(jù)市場(chǎng)需求規(guī)律,按最高供應(yīng)季節(jié)需求量除以月生產(chǎn)量來確定必須購(gòu)置的無菌工作臺(tái)數(shù)量。當(dāng)工作臺(tái)數(shù)量確定后,才能設(shè)計(jì)無菌工作臺(tái)的擺放方式,計(jì)算出接種室的需求面積。按日生產(chǎn)組培苗瓶數(shù)及培養(yǎng)期,結(jié)合周轉(zhuǎn)期計(jì)算需要的培養(yǎng)架數(shù)量,以此為基礎(chǔ)很容易就可以計(jì)算出培養(yǎng)室需求面積,一般為一臺(tái)無菌工作臺(tái),需配備培養(yǎng)架4架(1.2m×0.5m×5層),無菌操作室與培養(yǎng)室的面積比例為1:(1.5-2.0),或者根據(jù)培養(yǎng)架數(shù)量確定培養(yǎng)室面積,一般每個(gè)培養(yǎng)架需要1.0-1.2個(gè)m2。圍繞組培工廠建設(shè),其他必備的配套設(shè)施設(shè)備及操作用具購(gòu)置的數(shù)量,應(yīng)以每個(gè)無菌工作臺(tái)的需求量計(jì)算,解剖刀、鑷子、刀片等常用工具還要有充足的備用量。試管苗出瓶、移栽需要安排在過渡培養(yǎng)溫室或大棚內(nèi)進(jìn)行?,F(xiàn)代的組培工廠還需要建有種質(zhì)資源保存圃、原原種、原種圃、生產(chǎn)性栽培展示區(qū)等,其面積的大小應(yīng)根據(jù)不同植物的種類來確定。因此現(xiàn)代化組培工廠的建設(shè),需要認(rèn)真規(guī)劃、仔細(xì)計(jì)算、合理投資,使之既有系統(tǒng)性又實(shí)用,才能充分發(fā)揮最大的生產(chǎn)潛力。在今后的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)中,盡量降低成本,提高產(chǎn)品質(zhì)量和品種的可靠性。
組培室設(shè)計(jì)規(guī)劃之儀器設(shè)備配置篇
在植物組織培養(yǎng)過程中,根據(jù)所培養(yǎng)的植物種類、生產(chǎn)規(guī)模,選擇合適的器材、設(shè)施是十分必要的,只有這樣才能確保整個(gè)操作過程的順利進(jìn)行。在器材、設(shè)施的選擇上,不要貪大求洋,應(yīng)該在其是否實(shí)用上多下功夫。在研究型的組織培養(yǎng)操作中,往往對(duì)器材、設(shè)施的要求較高;而在生產(chǎn)型的組織培養(yǎng)中,則對(duì)器材、設(shè)施的要求卻較為粗放,因此管理者必須根據(jù)實(shí)際情況來進(jìn)行培養(yǎng)器材、設(shè)施的遴選。
在植物組織培養(yǎng)的過程中,從外植體的采收到試管苗的定植都必須要在特定的環(huán)境中進(jìn)行,例如,培養(yǎng)基的配制要在專用的器材、設(shè)施中進(jìn)行;外植體的接種要在專用的器材、設(shè)施中進(jìn)行。應(yīng)該根據(jù)植物組織培養(yǎng)不同階段的需要,選擇不同的器材、設(shè)施。只有從降低投入、提高工效、節(jié)約勞力等諸方面加以考慮,才能降低培養(yǎng)成本、提高培養(yǎng)效率。
在植物組織培養(yǎng)過程中,所使用的器材種類較多,但它們通??梢苑譃橥ㄓ闷骶摺⑹⒕?、計(jì)量器械、滅菌器械、接種器械、培養(yǎng)器械等幾種類型。在使用這些容器、設(shè)備時(shí),必須要了解它們的基本用途,并學(xué)會(huì)它們的基本用法。例如,不能給容量瓶加熱;必須用磨砂玻璃燈罩來熄滅正在燃燒的酒精燈;應(yīng)該定期更換超凈工作如的無菌濾膜等等。詳細(xì)操作可參考具體設(shè)備、容器的使用說明。
(1)通用器械
①燒杯:用來盛放、溶解化學(xué)藥劑等。常用的規(guī)格有50ml、100ml、250ml、500ml、1000ml。
②烘箱:用來烘干器械。
③恒溫水浴:用來溶解瓊脂等物質(zhì)。
④玻璃攪拌棒:用來配制培養(yǎng)基。
⑤洗耳球:用來輔助吸取、轉(zhuǎn)移少量液體。
⑥冰箱:用來貯存化學(xué)藥劑、植物材料等。
⑦牛角勺:用來轉(zhuǎn)移化學(xué)藥劑。
⑧玻璃漏斗:用來過濾溶液。
⑨剪刀:用來修剪外植體或剪切嫩莖。
⑩器械架:在無菌操作期間用來放置滅菌的器械。
(2)各種盛具
①搪瓷淺盤:用來承載各種器械容器。
②塑料盆:用于清洗培養(yǎng)容器。
③鐵絲筐:用來盛放滅菌容器等物品。
④純水水桶:用來存放去離子水或蒸餾水。常用的規(guī)格有10l、20l。
⑤塑料桶:用來存放洗滌溶液、廢棄溶液。
⑥各種規(guī)格的磨砂玻璃瓶:用來盛放培養(yǎng)母液,以及各種植物生長(zhǎng)物質(zhì)。
(3)計(jì)量器械
①量筒:用來量取一定體積的液體。常用的規(guī)格有25ml、50ml、100ml、500ml、1000ml。
②容量瓶:用來配制標(biāo)準(zhǔn)溶液。常用的規(guī)格有50ml、100ml、500ml、1000ml。
③大肚移液管:用來吸取定量溶液。常用的規(guī)格有1ml、5ml、10ml。
④刻度移液管:用來吸取定量植物生長(zhǎng)物質(zhì)溶液。常用的規(guī)格有1ml、5ml、10ml。
⑤移液管架:用來放置、固定移液管。
⑥酸度計(jì):用來檢測(cè)培養(yǎng)基的ph。
⑦藥物天平:用來稱取配制培養(yǎng)基的藥品。
⑧分析天平:用來稱取少量有化學(xué)試劑,進(jìn)行化學(xué)分析。
(4)滅菌器械
①磨砂口玻璃瓶:用來對(duì)植物材料進(jìn)行表面滅菌。
②酒精燈:用來進(jìn)行接種器材的表面滅菌。
③細(xì)菌過濾器:用來過濾不能進(jìn)行高溫滅菌的試劑溶液。
④無菌濾紙:用來汲取器材、植物材料表面的水分。
⑤無菌脫脂棉:用來進(jìn)行器械、植物材料表面的滅菌處理。
⑥真空泵:用來吸濾滅菌。
⑦高壓滅菌鍋:對(duì)培養(yǎng)基、接種器材進(jìn)行滅菌處理。
⑧可調(diào)試電爐:用來加熱高壓滅菌鍋。
⑨皮下注射器:用來對(duì)溶液進(jìn)行過濾、除菌。
⑩紫外線滅菌燈:用來對(duì)接種室、培養(yǎng)室、操作室等工作環(huán)境進(jìn)行滅菌處理。
(5)接種器械
①超凈工作臺(tái):用來過濾通過接種工作臺(tái)面的空氣,以便進(jìn)行無菌操作。
②小型噴霧器:裝載滅菌藥液,來給超凈工作臺(tái)等處噴霧滅菌。
③鈍頭鑷子:在接種操作、繼代培養(yǎng)時(shí)移取植物材料。
④尖頭鑷子:用來分離植物材料。
⑤解剖刀:用來切割植物材料。
⑥打孔器:用來切取大小一致的圓柱形植物材料。
⑦雙目顯微鏡:在解剖較小的外植體時(shí),用來觀測(cè)材料。
⑧細(xì)菌濾膜:用來進(jìn)行溶液的常溫除菌。
⑨接種針:用來轉(zhuǎn)移細(xì)胞團(tuán)、愈傷組織。
(6)培養(yǎng)器械
①試管:用來作為外植體的培養(yǎng)容器。常用的規(guī)格有2cm×15cm、3cm×15cm。
②培養(yǎng)皿:用來作為外植體的培養(yǎng)容器。常用的規(guī)格有直徑9cm、12cm。
③錐形瓶:即三角燒瓶,主要作為培養(yǎng)器材,常用的規(guī)格有50ml、100ml。
④顯微鏡:用來觀察植物材料。
⑤成套載玻片:用來制作植物材料顯微制片。
⑥鋁箔:用于培養(yǎng)容器封口。
⑦橡皮筋:用來束緊培養(yǎng)容器的封口材料。
⑧血球計(jì)數(shù)器:用來進(jìn)行植物細(xì)胞計(jì)數(shù)。
⑨空調(diào):用來調(diào)節(jié)操作間、培養(yǎng)室的溫度。
⑩搖床:用來進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)。