(2)進(jìn)行種苗定植操縱所使用的工作臺臺面、工具或工作職員手部均有可能在移植的過程中接觸到帶病毒的種苗而遭受病毒感染,進(jìn)而成為傳播病毒的媒介。
若統(tǒng)一批種苗內(nèi)有部門個體為病毒感染者,當(dāng)所有種苗放在統(tǒng)一容器內(nèi)處理時,也會造成其他個體受感染。
這些常出錯誤包括:(1)操縱者將種苗從瓶內(nèi)移出后,置于容器內(nèi)洗滌殘余培養(yǎng)基或用保護(hù)性藥劑處理,此時若使用統(tǒng)一容器處理不同批號的種苗,有些批號的種苗攜帶病毒,則殘留病毒會污染容器表面,導(dǎo)致再處理下一批種苗時發(fā)生病毒感染。
據(jù)調(diào)查,即使分生苗在瓶中無病毒感染,但若在移出瓶栽培過程中未能采取嚴(yán)格的預(yù)防病毒感染的措拖,仍舊會有感染病毒的情況發(fā)生。
3.組培苗并未感染病毒,但在移出瓶外定植過程中被病毒感染。
治理者可以采取練習(xí)員工,培養(yǎng)其敬業(yè)精神,加強(qiáng)品質(zhì)監(jiān)控等措施來降低種苗的病毒感染幾率。
(3)工作職員的疏忽與不良習(xí)慣:操縱過程中工作職員的疏忽或有不良習(xí)慣可能會進(jìn)步組培苗感染病毒的幾率。例如,使用火焰消毒工具時草率而不完全,或該換培養(yǎng)皿時沒有及時更換等都是組培苗難以避免病毒感染的樞紐因素。
(2)傳接培養(yǎng)皿被污染:除了利用無菌操縱臺進(jìn)行組培苗的傳接外,工作職員在操縱過程中也大都會應(yīng)用培養(yǎng)皿或支撐物來隔絕組培苗與無菌操縱臺臺面的直接接觸??杉偃缡褂貌划?dāng),則會造成不同批號種苗間的污染。嚴(yán)格來說,培養(yǎng)皿必需隨不同批號的種苗更換。由于假如上一批的種苗感染了病毒,可能會污染培養(yǎng)皿表面,而再次使用被污染的培養(yǎng)皿就會導(dǎo)致下一批種苗也受到病毒感染。
因為齒舌蘭環(huán)斑病毒與蕙蘭嵌紋病毒的性質(zhì)極其不亂,因此若缺乏適當(dāng)有效的滅除方法,此病毒極有可能長期存留污染無菌操縱臺的臺面或工具,甚至包括污染操縱職員的手部及衣物,從而有機(jī)會間接感染到組培苗。
(1)不準(zhǔn)確的工具消毒方式:組培所使用的操縱工具,如鑷子、解剖刀等均須經(jīng)由滅菌程序,才能避免細(xì)菌與真菌的感染,因此操縱者可根據(jù)自己的習(xí)慣采用不同的滅菌方法。傳統(tǒng)上多數(shù)采用高溫滅菌法,例如利用高溫烘箱的干熱滅菌法、利用高壓殺菌鍋的濕熱滅菌法及無菌操縱臺上使用的火焰消毒法。
(4)優(yōu)良性狀的親本并未感染病毒,但在組織培養(yǎng)過程中遭到病毒污染。若分生苗在母瓶期被病毒污染,則后續(xù)繁殖的種苗會全部攜帶病毒。據(jù)調(diào)查,操縱過程中所慣用的流程與技巧無法完全避免病毒污染,有可能導(dǎo)致不同批號的蘭花種苗之間發(fā)生相互傳染。
(3)操縱者固然篩選出優(yōu)良性狀的親本進(jìn)行病毒檢修,但這些親本恰好處于感染時期,所以組織內(nèi)的病毒濃度低或分布不平均,檢修結(jié)果誤以為這些親本無病毒感染。用這些親本進(jìn)行分生組織克隆,結(jié)果造成種苗攜帶病毒。
(2)已經(jīng)感染病毒的植株因為品種符合市場需求,操縱者未經(jīng)病毒檢修便進(jìn)行分生組織培養(yǎng),大量繁殖分生克隆苗,結(jié)果造成所繁殖的種苗全部攜帶病毒。
(1)假如感染病毒的植株被利用作為授粉的親本,采取果莢進(jìn)行無菌播種以繁殖實生苗,感病的果莢組織與絨毛中含有高濃度的病毒,在播種過程中會污染種子與培養(yǎng)基。因為齒舌蘭環(huán)斑病毒與蕙蘭嵌紋病毒均為極其不亂的病毒,因此在細(xì)胞外可以長期存活。待蘭花種子發(fā)芽后,病毒由人為移植操縱過程所造成的傷口入侵而感染部門幼苗。這些幼苗又成為病毒感染源,在繼代培養(yǎng)中繼承污染其他植株,甚至在實生苗成熟出瓶定植過程中,再次成為病毒污染源,傳染給其他蘭花幼苗。
防治蘭花病毒病最好的方法是在病害發(fā)生前預(yù)防其傳入,也就是要徹底了解病毒所有可能的傳播途徑與來源,然后予以全面地封殺,從而杜絕病毒傳入的機(jī)會。
(2)病毒特性及傳播方式胡瓜嵌紋病毒為胡瓜嵌紋病毒屬(cucumovirus)的一種。顆粒體為球形顆粒體,直徑28納米。此病毒的寄主范圍極為廣泛,可以感染85科365屬高達(dá)800種以上的植物。我國很多地區(qū)的大部門重要經(jīng)濟(jì)作物均有胡瓜嵌紋病毒感染的記實,其族群在田間分布極為普遍。此病毒可以由機(jī)械磨擦所致的傷口傳染。在田間主要由蚜蟲以非永續(xù)型方式媒介傳播,因為可以傳播胡瓜嵌紋病毒的蚜蟲種類眾多,所以此病毒族群分布十分廣泛。
cucumbermosaicvirus簡稱cmv(1)病癥最早有關(guān)胡瓜嵌紋病毒感染蘭花的記實是在蝴蝶蘭上發(fā)現(xiàn)的。當(dāng)時所記載的病癥是植株葉片上泛起與葉脈平行的黃化條紋。胡瓜嵌紋病毒也可使紅花品系蝴蝶蘭的花瓣產(chǎn)生褪色或條紋病癥。另外,曾在文心蘭標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)過胡瓜嵌紋病毒感染的情況。標(biāo)本葉片呈現(xiàn)不顯著的斑紋病癥,隱約可見與葉脈平行的黃色條紋,但是該植株大小與正常的植株大小無差別。
(2)病毒特性及傳播方式齒舌蘭環(huán)斑病毒為煙草嵌紋病毒屬(tobamovirus)的一種。顆粒體為短硬桿狀,長度約300納米。該屬病毒的共同特性是性質(zhì)極其不亂,在寄主細(xì)胞外耐熱性強(qiáng),在高達(dá)95℃的溫度下,仍可存活相稱時日。根據(jù)日本學(xué)者講演,齒舌蘭環(huán)斑病毒在20℃下,在細(xì)胞外可存活10年以上,為不亂性極高的傳染性病毒。本病毒只能經(jīng)過機(jī)械性傷口入侵植物體內(nèi),因此在組織培養(yǎng)或溫室栽培治理過程中,所有可能造成表面?zhèn)诘牟倏v,包括切花梗、修剪,甚至植株葉片間的磨擦,都可能成為病毒入侵感染的途徑。截止目前為止,尚未證明齒舌蘭環(huán)斑病毒可被任何專一性的媒介昆蟲傳播。但是任何可能在蘭株上造成機(jī)械性損傷的昆蟲或小型動物,如甲由、蝸牛等都會增加齒舌蘭環(huán)斑病毒感染的可能性,應(yīng)該留意防范。
簡稱orsv(1)病癥根據(jù)講演,可以感染齒舌蘭環(huán)斑病毒的蘭花種類超過20個屬以上。不同的蘭屬或蘭種所產(chǎn)生的病癥會有所差異。蝴蝶蘭、文心蘭、卡特蘭、報歲蘭、四季蘭及素心蘭等蘭種常常輕易被齒舌蘭環(huán)斑病毒感染,尤其是蝴蝶蘭。齒舌蘭環(huán)斑病毒最早在文獻(xiàn)上記載的病癥是環(huán)斑,另外嵌紋、斑紋、黃化條紋、花色條斑,甚至壞疽病癥均有記載。在這些病癥中以嵌紋與斑紋最為常見。另外有部門蘭花品種感染齒舌蘭環(huán)斑病毒后并不表現(xiàn)病癥,此現(xiàn)象在蝴蝶蘭及文心蘭的幼苗期特別常見,染病植株通常要等到第一次開花后才會逐漸顯現(xiàn)出病癥。另外,人工栽培的蘭園中蕙蘭嵌紋病毒與齒舌蘭環(huán)斑病毒復(fù)合感染統(tǒng)一蘭株的現(xiàn)象極為普遍,對蘭株的影響有加成效果,病癥會遠(yuǎn)比單一病毒感染時嚴(yán)峻很多。
目前尚未發(fā)現(xiàn)可以傳播蕙蘭嵌紋病毒的媒介昆蟲,其傳播途徑與齒舌蘭環(huán)斑病毒完全相同,病毒均由根系機(jī)械性傷口入侵及感染。
(2)病毒特性及傳播方式蕙蘭嵌紋病毒為馬鈴薯x病毒屬(potexvirus)的一種。此屬病毒在細(xì)胞外的不亂性固然不及煙草嵌紋病毒屬的病毒,但也是已知病毒中性質(zhì)極為不亂的一屬。其顆粒體稍可彎曲,長度約為450納米,細(xì)胞外耐熱溫度為60℃至70℃,在室溫前提下可存活25天。
cymbidiummosaicvirus簡稱cymv(1)病癥受蕙蘭嵌紋病毒感染的蘭花植株常常有產(chǎn)生壞疽病癥的傾向,如玄色壞疽雀斑、壞疽條紋等。感病植株除葉部、莖部產(chǎn)生壞疽外,花部也會產(chǎn)生壞疽,這是蕙蘭嵌紋病毒特有的病癥。輕易感病的蘭花品種有報歲蘭、嘉得利亞蘭、文心蘭、虎頭蘭、萬代蘭及蝴蝶蘭。壞疽斑有時只泛起于葉片下表面而不發(fā)生于上表面,此種現(xiàn)象在文心蘭、石斛蘭、萬代蘭及蝴蝶蘭上均有發(fā)生,因此常被栽培者誤以為真菌感染所致。部門感染蕙蘭嵌紋病毒的蘭屬植物,如虎頭蘭、報歲蘭、文心蘭及蝴蝶蘭也會產(chǎn)生黃綠斑駁的嵌紋或黃化條斑形病癥。另外也有部門蘭花種類感染后并不表現(xiàn)任何可辨認(rèn)的病癥。