使用液相色譜儀進(jìn)行分析時(shí),常用兩種洗脫方式,一種為等度洗脫,另一種為梯度洗脫。
用等度洗脫進(jìn)行色譜分離時(shí),由不同溶劑構(gòu)成的流動(dòng)相的組成,如流動(dòng)相的極性、離子強(qiáng)度、ph值等,在分離的全過程中皆保持不變。用梯度洗脫進(jìn)行色譜分離時(shí),在洗脫過程中含2種或兩種以上不同極性溶劑的流動(dòng)相組成會(huì)連續(xù)或間歇地改變,其間可調(diào)節(jié)流動(dòng)相的極性,改善樣品中各組分間的分離度。
使用梯度洗脫時(shí),也會(huì)使干擾分離的強(qiáng)保留雜質(zhì)組分在較短的時(shí)間內(nèi)從柱中清楚,使色譜柱保持干凈狀態(tài),以進(jìn)行下一次的分析。
梯度洗脫一般是指流動(dòng)相的組成隨分析時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)線性變化,即線性梯度洗脫,它可用于反相和正相液相色譜儀及離子對(duì)色譜法。
液相色譜儀分析中的梯度洗脫和氣相色譜儀分析中的程序升溫相似,它們都給色譜分離帶來新的活力,使色譜應(yīng)用范圍進(jìn)一步廣泛化、精細(xì)化。