熒光定量pcr(real-time pcr),是指在pcr擴增反應體系中加入熒光基團,通過對擴增反應中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。熒光定量pcr試劑盒特點及注意事項
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 pcr 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μl 反應體系的熒光定量 pcr。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
注意事項:
1.pcr反應應該在一個沒有dna污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個的pcr實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.pcr試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.pcr的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
關(guān)鍵詞:玻璃器皿