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如何尋找適合自己實驗應(yīng)用的生物標(biāo)志物

發(fā)布時間:2024-05-06
氧化應(yīng)激(oxidative stress,os)是機(jī)體活性氧成分與抗氧化系統(tǒng)之間平衡失調(diào)引起的一系列適應(yīng)性的反應(yīng)。干擾細(xì)胞正常的氧化還原狀態(tài),會制造出過氧化物與自由基導(dǎo)致毒性作用,因此損害細(xì)胞的蛋白質(zhì)、脂類和核酸。發(fā)生在人類的氧化壓力,被認(rèn)為是造成亞斯伯格癥候群、自閉癥、阿茲海默癥、帕金森氏癥、注意力缺陷過動癥、動脈粥樣硬化、心臟衰竭及癌癥等的成因。然而活性氧也有它的益處,免疫系統(tǒng)可利用活性氧攻擊并殺死病原。短期的氧化應(yīng)激在防止老化上,也提供了重要的步驟,稱做毒物興奮效應(yīng)。
氧化應(yīng)激可通過測量活性氧(ros)來直接評估,或通過過度產(chǎn)生的ros對脂質(zhì),蛋白質(zhì)和核酸造成的相關(guān)損害來間接評估。盡管直接測量ros是理想的方法,但是與ros的瞬時特性相比,通常更依賴于間接方法因為生物分子上的損傷標(biāo)記相對穩(wěn)定。
ros:氧氣作為正常代謝的一部分被電子還原,導(dǎo)致形成各種ros,包括過氧化氫(h2o2)和超氧化物(o2?-)。當(dāng)不受控制的氧化對生物系統(tǒng)造成壓力時,會對細(xì)胞大分子造成損害。ros的測定不能識別ros產(chǎn)生的來源(即正常狀態(tài)與疾病狀態(tài)),但是如果實驗?zāi)P吞幱趬毫ο?,則ros可能增加并且分子成分改變。
rns:在氧化應(yīng)激過程中也會產(chǎn)生活性氮(rns)。由一氧化氮合酶(nos)和o2?-合成的高含量一氧化氮(no?)導(dǎo)致過氧亞**鹽的形成。no?本身也與硫醇和鐵硫酶反應(yīng),而過氧亞**鹽與酪氨酸殘基反應(yīng)形成**酪氨酸。
dna/rna損傷:鳥嘌呤是dna和rna損傷時zui容易氧化的堿基。為糾正這種損傷而啟動的修復(fù)過程將下列氧化的鳥嘌呤類釋放到尿液中:
8-羥基鳥嘌呤——無核糖的堿
8-羥基鳥苷——rna的核苷
8-羥基-2-脫氧鳥苷——dna的脫氧核苷
可以檢測多種氧化鳥嘌呤種類的測定法比只限于分析一種(例如8-羥基-2-脫氧鳥苷)的測定法能捕獲更多的氧化損傷生物學(xué)相關(guān)產(chǎn)物。
蛋白質(zhì)氧化和硝化:蛋白質(zhì)氧化的zui常見標(biāo)志是蛋白質(zhì)羰基含量。氧化還原循環(huán)陽離子與蛋白質(zhì)結(jié)合,并與ros的攻擊結(jié)合,導(dǎo)致形成含有羰基(酮,醛)的氨基酸衍生物。香煙煙霧和醛類也會將羰基引入蛋白質(zhì)中。另外,ros暴露于蛋白質(zhì)的蛋氨酸殘基會產(chǎn)生蛋氨酸亞砜(meto),這是一種氧化修飾,如果未被meto還原酶逆轉(zhuǎn),則會進(jìn)一步氧化為蛋氨酸砜,并可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)功能障礙。
蛋白質(zhì)上**酪氨酸的存在用作no?與 o2反應(yīng)時體內(nèi)形成的過氧亞**鹽的標(biāo)志物。當(dāng)過氧亞**鹽經(jīng)歷雜化裂解時,釋放出的硝化氮離子**鹽蛋白酪氨酸殘基。no?可以通過rns介導(dǎo)的s-亞**化過程直接修飾蛋白質(zhì),其中no?基團(tuán)與蛋白質(zhì)半胱氨酸殘基的硫醇基結(jié)合,從而形成s-no部分。
脂質(zhì)過氧化:脂質(zhì)過氧化導(dǎo)致不飽和脂質(zhì)的高反應(yīng)性和不穩(wěn)定的氫過氧化物的形成。 它們可以通過不穩(wěn)定的氫過氧化物的各種分解產(chǎn)物(例如烷烴,酮,醛)直接或間接評估。通過組織脂質(zhì)的隨機(jī)氧化產(chǎn)生的8-異前列腺烷目前被認(rèn)為是體內(nèi)脂質(zhì)過氧化zui可靠的生物標(biāo)記之一。它是脂質(zhì)過氧化作用的特定產(chǎn)物,其穩(wěn)定且在所有正常生物體液和組織中的含量均可檢測到。磷脂中酯化水平的測量可用于確定目標(biāo)靶位點脂質(zhì)過氧化的程度。
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