天然水中油類的紫外分光光度法測(cè)定
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?
加深對(duì)環(huán)境中油類污染的認(rèn)識(shí)，掌握油類的分析方法和技術(shù)，學(xué)會(huì)使用紫外 分光光度計(jì)。
實(shí)驗(yàn)原理
水中的油類來(lái)自較高級(jí)生物或浮游生物的分解，也有來(lái)自工業(yè)廢水和生活污 水的污染。漂浮于水體表面的油，影響空氣－水體界面中氧的交換。分散于水中的油，部分吸附于懸浮微粒上，或以乳化狀態(tài)存在于水體中，部分溶于水中。水 中油可被微生物氧化分解，從而消耗水中溶解氧，使水質(zhì)惡化。 重量法是常用的分析方法，它不受油的品種限制，所測(cè)定的油不能區(qū)分礦物油和動(dòng)、植物油。重量法方法準(zhǔn)確，但操作繁雜，靈敏度差，只適于測(cè)定 5mg/l 以上的油品。紫外分光光度法比重量法簡(jiǎn)單。石油類含有的具有共軛體系的物質(zhì) 在紫外光區(qū)有特征吸收峰。帶有苯環(huán)的芳香族化合物主要吸收波長(zhǎng)微 250～ 260nm，帶有共軛雙鍵的化合物主要吸收波長(zhǎng)為 215～230nm。一般原油的兩個(gè)吸 收峰波長(zhǎng)為 225 及 256nm，其他油品如燃料油、潤(rùn)滑油等的吸收峰也與原油相近。 本方法測(cè)定波長(zhǎng)選為 256nm，檢出濃度為 0.05mg/l，測(cè)定上限為 10mg/l。
儀器和試劑
紫外分光光度計(jì)（具有 1cm 石英比色皿）。
1l 分液漏斗。水中油類的紫外分光光度法測(cè)定 25ml 容量瓶。
石油醚（60～90℃）或正己烷：純化后使用，透光率大于 80％。 如不純，可用下法純化。 純化：將 0.30～0.15mm（60～100 目）粗孔微球硅膠和 0.246～0.125mm（70～ 120 目）中性層析氧化鋁在 150～160℃活化 4h，趁溫?zé)嵫b入直徑 2.5cm、長(zhǎng) 75cm 的玻璃柱中，使硅膠柱高 60cm，上面覆蓋 5cm 厚的氧化鋁層。將石油醚通過(guò)此 柱后收集于試劑瓶中。以水為參比，在 256nm 處透光率應(yīng)大于 80％。
油標(biāo)準(zhǔn)貯備液：用 20 號(hào)重柴油、15 號(hào)機(jī)油或其他認(rèn)定的標(biāo)準(zhǔn)油 品配制。準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)油品 0.1000g 溶于石油醚中，移至 100ml 容量瓶中，并用 石油醚稀釋至標(biāo)線，此溶液每毫升含 1.00mg 油，貯于冰箱備用。
（1+1）硫酸。 氯化鈉。（事先于馬福爐 300℃烘 1h，冷后裝瓶）。
實(shí)驗(yàn)步驟
標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 把油標(biāo)準(zhǔn)貯備液用石油醚稀釋為每毫升含 0.100mg 油的標(biāo)準(zhǔn)液。向 8 個(gè) 10ml 容量瓶中依次加入油標(biāo)準(zhǔn)液 0.20，0.50，1.00， 2.00，3.00，5.00，7.00，10.00ml，用石油醚稀釋至標(biāo)線。其相應(yīng)的濃度為 2.00， 5.00，10.00，20.0，30.0，50.0，70.0，100.0mg/l。最后，在波長(zhǎng) 256nm 處， 用 1cm 石英比色皿，以石油醚為參比液測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
將水樣 500ml 全部?jī)A入 1000ml 分液漏斗中，加入 5ml（1+1）硫酸 （若水樣取樣時(shí)已酸化，可不加）及 20g 氯化鈉，加塞搖勻，用 15ml 石油醚洗 采樣瓶，并把此洗液移入分液漏斗中，充分振搖 2min（注意放氣），靜置分層。 把下層水樣放入原采樣瓶中，上層石油醚放入 25ml 容量瓶中，再加入 10ml 石油 醚，重復(fù)提取水樣一次，合并提取液于容量瓶中。加石油醚至標(biāo)線，搖勻。若容量瓶里有水珠或渾濁，可加入少量脫水。
在波長(zhǎng) 256nm 處，用 1cm 石英比色皿，以脫芳烴的石油醚為參比， 測(cè)定其吸光度，并在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的濃度值。
結(jié)果與討論
c 油（mg/l）＝c*v2/v1 式中：c——從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出的相應(yīng)油濃度（mg/l）； v1——被測(cè)水樣體積（ml）； v2——石油醚定容體積（ml）。
使用的石油醚應(yīng)在一個(gè)較大的容器中混勻，使用相同透光率的石油醚， 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線及樣品測(cè)定，否則會(huì)由于空白值不同而產(chǎn)生誤差。
采集的樣品必須有代表性。當(dāng)只測(cè)定水中乳化狀態(tài)的石油時(shí)，要避開(kāi) 漂浮在水面的油。一般在水表面以下 20～50cm 處取水樣。若要連同油膜一起采 樣，要注意水的深度、油膜厚度及覆蓋面積。
采樣瓶應(yīng)為定容的（如 500 或 1000ml）清潔玻璃瓶，用溶劑清洗干凈， 勿用肥皂洗。每次采樣時(shí)，應(yīng)裝水至刻度線。
為了保存水樣，采集樣品之前，可向瓶里加入硫酸【每升水樣加 5ml（1+1） 硫酸】，使水樣 ph＜2，抑制微生物活動(dòng)，于低溫下（＜4℃）保存。在常溫下， 樣品可保存 24h。