rna marker 1000使用妙招
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品rna marker 1000由體外轉(zhuǎn)錄得到的7條高純度單鏈rna組成,其長(zhǎng)度分別為100、200、300、400、600、800、1000 bases,每微升產(chǎn)品中rna量約為700 ng,適用于rna的常規(guī)凝膠電泳。
操作步驟
1. 取1-2 μl rna marker 1000與2×rna loading buffer按等體積比例混合,置于70℃孵育10 min后,立即冰浴2 min,即可進(jìn)行電泳檢測(cè);
2. rna電泳:
a. 普通瓊脂糖凝膠電泳(不推薦):2-5%瓊脂糖凝膠(加入核酸染料eb),用tae buffer進(jìn)行電泳;
b. 甲醛瓊脂糖變性凝膠電泳(推薦):1-3%瓊脂糖凝膠,以1%瓊脂糖凝膠制備為例:稱取0.5 g瓊脂糖加入36 ml rnase-free water(推薦g4700或g3004)中,加熱溶化后,加入5 ml 10×mops buffer,待溶液冷卻至不燙手時(shí),加入9 ml 37%甲醛溶液,根據(jù)需要加入核酸染料eb,混勻后倒膠。用1×mops buffer進(jìn)行電泳,結(jié)束后即可經(jīng)凝膠成像儀觀察。
注意事項(xiàng)
1. 實(shí)驗(yàn)時(shí)請(qǐng)帶好實(shí)驗(yàn)手套、口罩,實(shí)驗(yàn)耗材需無菌無酶,防止rnase污染導(dǎo)致rna降解。
2. rna marker條帶為單鏈線性rna,適用于單鏈線性rna樣品的分子量參照,對(duì)于total rna,本產(chǎn)品只能作為定性參照。
3. 為了避免rna marker反復(fù)凍融降解,建議進(jìn)行合理分裝使用