當培養(yǎng)人正常組織來源細胞時，重要的是要記住，他們不是細胞系，不能同等對待。因為sciencell在原代細胞培養(yǎng)方面的廣泛工作，我們非常熟悉研究人員在培養(yǎng)原代細胞時遇到的常見問題。這里有六個在原代細胞培養(yǎng)中的常見錯誤，以及如何糾正這些錯誤。
錯誤＃1：一小管原代細胞在水浴中解凍一段時間
糾正＃1：原代細胞對解凍過程非常敏感，因此將小瓶置于37℃水浴中，保持并輕輕旋轉(zhuǎn)直到內(nèi)容物剛剛解凍是很重要的。然后應立即從水浴中取出小瓶，并轉(zhuǎn)移到無菌操作臺。確保您的培養(yǎng)瓶在解凍前已經(jīng)準備就緒，以便可以立即用于接種細胞，并置于培養(yǎng)箱中。
錯誤＃2：解凍小瓶后直接離心原代細胞
糾正＃2：我們不建議在解凍后離心細胞，因為離心程序比少量的dmso殘留更有害。記住，在恢復原代細胞后的第二天更換培養(yǎng)基以去除任何殘留的dmso。
錯誤＃3：允許原代細胞變得過于融合
糾正＃3：當生長至100％匯合時，原代細胞可以變得衰老。記住，原代細胞不是100％純，因此重要的是盡量減少污染細胞的生長。我們建議在細胞達到90-95％融合時，對原代細胞進行傳代培養(yǎng)。
錯誤＃4：傳代原代細胞時過度胰蛋白酶消化
糾正＃4：當細胞傳代時，使用低濃度的胰蛋白酶并在顯微鏡下密切監(jiān)測細胞。此外，記得在胰蛋白酶消化后*中和細胞中的胰酶，因為任何活性的胰蛋白酶都將損傷細胞。我們特別推薦專門為原代細胞配制的胰蛋白酶中和溶液（cat＃0113），但也可以使用10％血清或大豆胰蛋白酶抑制劑（cat＃0173）。
錯誤＃5：原代細胞可以很容易地重新凍存
糾正＃5：通常我們不推薦重新凍存原代細胞，因為這可以促進細胞衰老和/或?qū)е鹿δ茏兓Ｔ毎浅Ｃ舾?，重新凍結(jié)可能導致細胞死亡或損傷。
錯誤6：原代細胞可以無限的增殖
糾正＃6：與細胞系不同，原代細胞具有有限的擴增能力。我們建議盡早使用原代細胞進行實驗以防止遺傳漂移。此外，如果你正在使用一個增值困難的細胞類型，你應該密切監(jiān)測細胞形態(tài)，因為少量混雜的細胞（如成纖維細胞）可能隨著時間的推移，大量生長從而成為主要細胞。
在培養(yǎng)人正常組織來源細胞時，記住這六個技術(shù)提示是非常重要的。z終，如果你認真、仔細的對待你的細胞，它們也會更好地為你的實驗服務。
內(nèi)皮細胞的分化蛋白6igg 人二胺氧化酶(dao)
內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁igg 人兒茶酚胺(ca)
內(nèi)皮因子維生素b12受體igg 人多藥耐藥相關蛋白(mrp)
內(nèi)皮脂肪酶igg 人多形核白彈性蛋白酶(pmn elastase)
內(nèi)皮脂肪酶igg 人多效生長因子(ptn)
內(nèi)收蛋白igg 人多肽yy(peptide-yy)
內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液酸蛋白igg 人多免疫球蛋白受體(poly-igr)
內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素（c端）igg 人多聚血清蛋白(phsa)
內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(n端)igg 人多聚adp核糖聚合酶(parp)
人正常組織來源細胞