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Jurkat(Clone E6-1)細(xì)胞培養(yǎng)攻略

發(fā)布時(shí)間:2024-04-25
jurkat(clone e6-1)概述:
jurkat(clone e6-1)細(xì)胞,人t淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞,是肯德爾·史密斯博士將jurkat細(xì)胞在41°c孵育48h,于巨噬細(xì)胞上進(jìn)行有限稀釋克隆得到的,jurkat(clone e6-1)細(xì)胞是從14歲男性急性t細(xì)胞白血病患者的外周血建立的。在用佛波酯和針對(duì)t3抗原的凝集素或單克隆抗體刺激后產(chǎn)生大量的il-2(需要兩種刺激物誘導(dǎo)il-2的產(chǎn)生)??捎糜诿庖呦到y(tǒng)疾病研究、免疫學(xué)和免疫腫瘤學(xué)研究,該細(xì)胞株克服了jurkat細(xì)胞系建立初期易被支原體污染的缺點(diǎn)。
圖 jurkat細(xì)胞系譜
jurkat(clone e6-1)基本信息:
細(xì)胞形態(tài)
淋巴細(xì)胞樣
生長特性
單個(gè)或成團(tuán),懸浮生長
生長培養(yǎng)基
rpmi-1640(abs9484)+10%fbs(abs972)+1%p/s(abs9244)
倍增時(shí)間
約20h
換液
每2-3天一次(具體時(shí)間取決于細(xì)胞密度)
凍存液
dmso:fbs:dmso=1:2:17
圖 jurkat(clone e6-1)形態(tài)圖
jurkat(clone e6-1)換液方法:
補(bǔ)液法:培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變黃,則補(bǔ)加適量的新鮮培養(yǎng)基(1-2ml左右),補(bǔ)充2-3次后,1200rpm (約250g)3min,全部離心,棄上清,將細(xì)胞沉淀重懸于新的培養(yǎng)基中;
半換液法:豎起培養(yǎng)瓶靜置一段時(shí)間(10min左右),待細(xì)胞沉入底部,小心吸出約一半的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)移到離心管離心,若有細(xì)胞沉淀,用少量培養(yǎng)基重選后再移入培養(yǎng)瓶,培養(yǎng)瓶瓶補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基;
注意:上述過程中若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過1×106cells/ml則考慮換液,建議細(xì)胞密度保持在1×105-1×106cells/ml,細(xì)胞密度不可超過3×106/ml。
圖 半換液示意圖
培養(yǎng)要點(diǎn):
1、該細(xì)胞受密度影響較大,低密度時(shí)細(xì)胞生長速度較慢,接種和培養(yǎng)時(shí)注意細(xì)胞密度;
2、clone e6-1復(fù)蘇后有時(shí)需要5-7d才能恢復(fù)到凍存前的狀態(tài),前兩天勿對(duì)其進(jìn)行操作;
3、建議凍存密度提高到2-3×106/ml,凍存率可達(dá)到70%左右;
4、若發(fā)現(xiàn)較大細(xì)胞團(tuán),可用槍頭輕微吹散,切勿用力過度,對(duì)其產(chǎn)生機(jī)械刺激。
jurkat(clone e6-1)的應(yīng)用:
1、jurkat(clone e6-1)已被廣泛用作tcr信號(hào)通路的遺傳和生化分析的有力工具;
2、jurkat和jurkat(clone e6-1)都可用于成像研究,以確定超抗原特異性結(jié)合物中免疫突觸(is)組裝的關(guān)鍵;
圖 e6.1 lfa-1high和raji細(xì)胞(apc)的15min綴合物進(jìn)行免疫熒光分析
3、jurkat細(xì)胞模型已廣泛應(yīng)用于t細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞因子和受體的表達(dá), 以及各類感染性疾病的治療和機(jī)制研究中, 如hiv、eb、丙型肝炎等病毒的感染研究,其實(shí)驗(yàn)結(jié)果可作為人周圍血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)研究和前期實(shí)驗(yàn)。
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本期小愛產(chǎn)品推薦:
貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 規(guī)格
abs972 胎牛血清(優(yōu)級(jí)) 500ml
abs974 胎牛血清(標(biāo)準(zhǔn)級(jí)) 500ml
abs9484 rpmi 1640培養(yǎng)基(含l-谷氨酰胺,不含hepes) 500ml
abs9244 青霉素-鏈霉素溶液(100×,雙抗) 100ml
abs9107 佛波酯 1mg
*本文圖片來源于網(wǎng)絡(luò),僅供學(xué)習(xí)參考用
參考文獻(xiàn)
[1] cassioli c, balint s, compeer eb, et al. increasing lfa-1 expression enhances immune synapse architecture and t cell receptor signaling in jurkat e6.1 cells. front cell dev biol. 2021;9:673446. published 2021 jul 23. doi:10.3389/fcell.2021.673446
[2] chen jl, nong gm. [advances in application of jurkat cell model in research on infectious diseases]. zhongguo dang dai er ke za zhi. 2018 mar;20(3):236-242. chinese. doi: 10.7499/j.issn.1008-8830.2018.03.014. pmid: 29530126; pmcid: pmc7389782.
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