魚肉中*的測(cè)定——spe-uplc-ms/ms法解決方案
參考標(biāo)準(zhǔn)《gb/t 21323-2007 動(dòng)物組織中氨基糖苷類藥物殘留量的測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法》
目前有關(guān)*檢測(cè)的文獻(xiàn)和標(biāo)準(zhǔn)較少，主要參考標(biāo)準(zhǔn)《gb/t 21323-2007 動(dòng)物組織中氨基糖苷類藥物殘留量的測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法》；液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(hplc-ms/ms)具有高靈敏度和高特異性，適用于基質(zhì)復(fù)雜、樣品組分含量很低的獸藥殘留的確證分析。
方法優(yōu)勢(shì)
迪馬科技開發(fā)的《魚肉中*的檢測(cè)》：
采用三氯乙酸水提取、proelut pxc固相萃取柱凈化和超液相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)；具有前處理步驟簡(jiǎn)單、回收率高、方法穩(wěn)定性好、凈化效果優(yōu)異等特點(diǎn)；使用氰基液相色譜柱進(jìn)行分析，峰形和保留時(shí)間均符合要求；過柱方法簡(jiǎn)單易操作，對(duì)操作人員要求不高，檢測(cè)成本相對(duì)較低；定量限是20 μg/kg，與國(guó)標(biāo)方法一致。魚肉中*的測(cè)定——spe-uplc-ms/ms法
1、適用范圍
本方案適用于魚肉中*檢測(cè)。本方法定量限是20.0 μg/kg。
2、 標(biāo)準(zhǔn)品配制
(1) 單標(biāo)儲(chǔ)備液1000 μg/ml，準(zhǔn)確稱取*，用水配制成1000 μg/ml的儲(chǔ)備液。
(2) 中間液10.0 μg/ml，吸取適量單標(biāo)儲(chǔ)備液1000 μg/ml，用水配制成10 μg/ml的中間液。
3、提取
(1) 稱取樣品（魚肉）5.0 g（至0.05 g），置于50ml離心管中。加入20 ml三氯乙酸水（25 g/l）和2 ml二氯甲烷，渦旋分散，振蕩5 min，8000 r/min離心2min，收集上清液；
(2) 在上清液中加入5 ml乙腈混勻，8000 r/min離心2 min，待凈化（離心為了去除乙腈水溶解時(shí)產(chǎn)生的氣泡）。
4、凈化—— proelut pxc 60 mg/3 ml（cat.# 68203）
(1)活化：
依次加入3 ml甲醇，3 ml水，流出液棄去；
(2)上樣：
將上樣液加入柱中，流出液棄去；
(3)淋洗：
(4)洗脫：
依次用5 ml水、3 ml甲醇淋洗，流出液棄去；
3 ml 20%氨水甲醇洗脫，收集洗脫液；
(5)定容：
將洗脫液在40 ℃水浴下通入氮?dú)獯抵?.2 ml，然后用流動(dòng)相重新定容至0.5 ml，上機(jī)分析。
同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液。
5、色譜條件
uplc 條件：
色譜柱：platisil cn，150 x 4.6 mm，5 μm (cat.# 99506)
流 速：0.5 ml/min
進(jìn)樣量：5 μl
柱 溫：35 ℃
流動(dòng)相： a：3%甲酸水 b：3%甲酸乙腈 a：b=9:1
質(zhì)譜條件：
電離模式：esi
掃描方式：正離子掃描
檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)
電噴霧電壓：5500 v
霧化氣壓力：60 psi
輔助氣壓力：60 psi
氣簾氣壓力：20 psi
離子源溫度：550 ℃
定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、碰撞氣能量及去簇電壓見下表
藥物名稱
定性離子對(duì)
（m/z）
(母離子/子離子)
定量離子對(duì)
（m/z）
(母離子/子離子)
碰撞氣能量/ev
去簇電壓/v
*
468.2/163.1
468.4/163.2
35
70
468.4/144.8
25
468.4/205.3
30
468.2/324.1
20
6、添加回收結(jié)果
魚肉中*檢測(cè)的添加回收結(jié)果(%)
回收率（%）
添加濃度為20 μg/kg，加標(biāo)量：10 μg/ml，加10 μl
龍利魚
鯽魚
鰻魚
*
89.2
95.3
93.7
rt 3.03 min *
*標(biāo)準(zhǔn)品0.2 μg/ml的mrm色譜圖
魚肉中*的測(cè)定——spe-uplc-ms/ms法相關(guān)產(chǎn)品信息
貨號(hào)
名稱
規(guī)格
樣品前處理
68203
proelut pxc
60 mg/3 ml 50/pk
244358
12管防交叉污染真空spe萃取裝置
12位
4803
1,3,6 ml柱管通用連接器
15/pk
4806
考克(控制流量)
15/pk
99011
真空/正壓兩用泵，無(wú)油
1/pk
99013
抽濾瓶套裝
(包括硅橡膠管2米, 2 l抽濾瓶及橡膠塞)
1/pk
30039
fitmax針頭式過濾器 nylon
13 mm, 0.22 μm 100/pk
30040
fitmax針頭式過濾器 nylon
13 mm, 0.45 μm 100/pk
色譜柱及保護(hù)柱
99506
platisil cn色譜柱
150×4.6 mm，5 μm
hplc溶劑?緩沖鹽?離子對(duì)試劑
50102
甲醇 hplc級(jí)
4 l
50101
乙腈 hplc級(jí)
4 l
50117
二氯甲烷 hplc級(jí)
4 l
50144
甲酸 hplc級(jí)
50 ml
通用色譜產(chǎn)品
52401b
瓶架/藍(lán)色
50孔
52401a
瓶架/白色
50孔
1034
樣品瓶（棕色/螺紋）
2 ml, 100/pk
1035
樣品瓶蓋/含墊（已經(jīng)組裝）
100/pk
h80465
hplc 進(jìn)樣針
25 μl
紅色產(chǎn)品貨號(hào)#30039、#30040、#1034、#1035*