風(fēng)起“云”涌——沃特世18種鄰苯二甲酸鹽uplc/ms/ms分析解決方案
近日，中國臺灣媒體報道了起云劑遭受增塑劑污染的事件，導(dǎo)致食品安全檢測市場頓時風(fēng)起“云”涌，鄰苯二甲酸鹽的檢測再度成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。
起云劑（又名渾濁劑、乳濁劑、增濁劑）也就是我們常說的乳化穩(wěn)定劑。主要應(yīng)用于飲料和奶類制品。在飲料中使用，有助于釋放與保留果汁飲料的香氣，包埋果汁飲料的異味、雜味，也能增強(qiáng)果汁飲料口感的潤滑性、厚實(shí)感，尤其是有效改良果汁飲料的天然感觀，顯著提高果汁飲料的品質(zhì)質(zhì)量。起云劑的主要成分為風(fēng)味油、單體香油、增重劑、乳化穩(wěn)定劑、乳化劑、水，它本身對人體并沒有危害，本次事件的發(fā)生是由于少數(shù)起云劑生產(chǎn)廠家為降低成本使用在食品中禁用的增塑劑類物質(zhì)鄰苯二甲酸鹽代替原本應(yīng)該使用的棕櫚油，從而引發(fā)了食品安全事件。
確保食品添加劑或者食品本身是否含有鄰苯二甲酸鹽類物質(zhì)的一個途徑就是使用分析手段對其進(jìn)行檢測。
我們常說的鄰苯二甲酸鹽是一類結(jié)構(gòu)比較相似的化合物，在2011年6月，中國衛(wèi)生部將17種鄰苯二甲酸鹽類物質(zhì)列入《食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑名單（第六批）》名單，如下：
鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（dehp）、
鄰苯二甲酸二異壬酯（dinp）、
鄰苯二甲酸二苯酯（dpp）、
鄰苯二甲酸二甲酯（dmp）、
鄰苯二甲酸二乙酯（dep）、
鄰苯二甲酸二丁酯（dbp）、
鄰苯二甲酸二戊酯（dpp）、
鄰苯二甲酸二己酯（dhxp）、
鄰苯二甲酸二壬酯（dnp）、
鄰苯二甲酸二異丁酯（dibp）、
鄰苯二甲酸二環(huán)己酯（dchp）、
鄰苯二甲酸二正辛酯（dnop）、
鄰苯二甲酸丁基芐基酯（bbp）、
鄰苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯（dmep）、
鄰苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯（deep）、
鄰苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯（dbep）、
鄰苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯（bmpp）
本方法介紹了兩種基于沃特世超液相色譜技術(shù)（uplc技術(shù)）分析18種（含中國臺灣fda要求）鄰苯二甲酸鹽的方法，方法一為采用沃特世超液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（uplc/ms/ms），該方法具有分析速度快，靈敏度高的特點(diǎn)。適用于實(shí)驗(yàn)室擁有質(zhì)譜系統(tǒng)并追求檢測靈敏度的用戶。方法二為采用沃特世超液相色譜系統(tǒng)和二極管陣列檢測器（uplc/pda）分析方法，適用于暫時還不具有質(zhì)譜系統(tǒng)的用戶。
樣品提取（中國臺灣fda方法）：
取混勻后樣品1g，稱量，置于50ml容量瓶，加入約45ml 甲醇，超聲波震蕩30min, 冷卻后用meoh 定容到50ml。靜置后，取上部溶液約5ml置于離心管中，于 3500rpm離心10min,取上清液裝瓶,待測。對于基質(zhì)比較復(fù)雜的樣品，對于提取后的樣品可以采用進(jìn)一步的固相萃取凈化手段。
【方法一：uplc/ms/ms方法】
實(shí)驗(yàn)條件
a．uplc條件
lc系統(tǒng)：acquityuplchclass系統(tǒng)
色譜柱：acquityuplchssc18，1.7um，2.1x100mm，
流動相a：0.1%fa水溶液
流動相b：乙腈
流速：0.4ml/min
梯度洗脫:梯度表
時間（分） 流速
（ml/min） a
（%） b
（%） 曲線
0.00 0.40 65 35 *
1.50 0.40 25 75 6
2.00 0.40 0 100 6
6.20 0.40 0 100 6
7.50 0.40 65 35 1
進(jìn)樣體積：10ul
柱溫：35℃,
樣品溫度：10℃
強(qiáng)洗溶劑：acn
弱洗溶劑：h2o:acn=95:5
運(yùn)行時間：7.5分鐘
b.ms條件:
系統(tǒng)：acquityuplctqd
離子化模式：esi+
電離電壓：3.2kv
離子源溫度：120℃
脫溶劑氣溫度：400℃
脫溶劑氣流量:650l/hr
18種鄰苯二甲酸鹽分析結(jié)果（濃度：10ppb）
（dmp、dmep、deep、dep、dphp、dehp、bbp、dibp、dbp、dbep、dpp、dchp、bmpp、dhxp、dnop、dinp、dnp、didp）
部分mrm通道:
【方法二：uplc/pda方法】
a．uplc/pda條件
儀器系統(tǒng)：watersuplch-class/pda
色譜柱：acquityuplchssc18（1.7um,2.1×100mm）
波長：225nm，
柱溫：45℃，
流速：0.4ml/min
流動相：a-水，b-乙腈，進(jìn)行梯度洗脫
18種鄰苯二甲酸鹽色譜分析結(jié)果如下圖所示
保留時間（min） 中文名稱 英文名稱 峰序列
4.482 鄰苯二甲酸二甲酯 dmp 1
4.896 鄰苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯 dmep 2
8.483 鄰苯二甲酸二乙酯 dep 3
8.622 鄰苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯 deep 4
14.176 鄰苯二甲酸二（2-丙基庚）酯 dphp 5
15.137 鄰苯二甲酸丁基芐基酯 bbp 6
15.311 鄰苯二甲酸二異丁酯 dibp 7
15.464 鄰苯二甲酸二丁酯 dbp 8
15.616 鄰苯二甲酸二-（3-丁氧基）乙酯 dbep 9
17.894 鄰苯二甲酸二戊酯 dpp 10
18.013 鄰苯二甲酸二環(huán)己酯 dchp 11
19.416 鄰苯二甲酸二（4-甲基-2戊基）酯 dmpp 12
19.929 鄰苯二甲酸二己酯 dhxp 13
22.644 鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯 dehp 14
23.103 鄰苯二甲酸二正辛酯 dnop 15
23.727 鄰苯二甲酸二異壬酯 dinp 16
24.335 鄰苯二甲酸二壬酯 dnp 17
24.570 鄰苯二甲酸二異癸酯 didp 18
飲料基質(zhì)1加標(biāo)與空白結(jié)果
飲料基質(zhì)2加標(biāo)與空白結(jié)果
關(guān)于watersacquityuplch-class
hplc的操作方法，uplc的性能
如果您正在進(jìn)行常規(guī)分析，或方法開發(fā)，或僅僅是喜歡四元泵系統(tǒng)多溶劑的靈活使用，而又渴望獲得uplc技術(shù)帶來的快速、高靈敏度、高分離度的性能，那么沃特世公司acquityuplch-class系統(tǒng)是您目前*的選擇。acquityuplch-class系統(tǒng)是一套經(jīng)過優(yōu)化的*系統(tǒng)，具有四元溶劑混合的靈活性和簡易性，并帶有一個流通式進(jìn)樣器，可實(shí)現(xiàn)uplc分離的*性能——高分離度、靈敏度和高通量，同時還保持了acquity系統(tǒng)所被*的耐用性和可靠性。
選擇acquityuplch-class，您可以在面向未來的lc平臺上繼續(xù)運(yùn)行現(xiàn)有的hplc方法，并可實(shí)現(xiàn)向uplc分離的無縫轉(zhuǎn)換。當(dāng)您一切準(zhǔn)備就緒后，即可使用集成系統(tǒng)工具和可靠的色譜柱工具包進(jìn)行方法轉(zhuǎn)換和方法開發(fā)，以簡化過渡流程。
特色：
多溶劑混合：qsm可將四種溶劑按任何組合或比例混合。使用選配的內(nèi)部溶劑選擇閥，將可選溶劑擴(kuò)展到多達(dá)九種，方法更加靈活。
直接注射取樣：sm-ftn的針流入路徑采用專門的技術(shù)，在高壓力下能夠保證的進(jìn)樣針密封性，可實(shí)現(xiàn)高精度注射，具有的樣品回收率。
下一代色譜柱溫箱：我們的新式uplc色譜柱加熱器和管理器已實(shí)現(xiàn)了標(biāo)準(zhǔn)化，具有易于操作、體積小的主動式溶劑預(yù)加熱器，使系統(tǒng)之間具有相同的效率。色譜柱預(yù)熱器保證了穩(wěn)定的熱效能；色譜柱管理器提供了多區(qū)域的靈活性，溫度范圍為4至90°c，并可疊加使用。
受控的滯留體積：acquityuplch-class的smartstart技術(shù)（待批）可同時對梯度起始時間和各個預(yù)注射步驟進(jìn)行自動管理。通過將這些典型的連續(xù)過程疊加起來，能夠zui大程度地縮短循環(huán)時間。
關(guān)于watersacquityuplctqd
沃特世tq檢測器是為一體化的uplc®/ms/ms定量分析而開發(fā)的儀器，達(dá)到串聯(lián)四極桿ms的*選擇性、穩(wěn)定性、速度及準(zhǔn)確性。為契合ultraperformancelc®（uplc）的超高性能，tq檢測器以zui快的速度采集數(shù)據(jù)。與acquityuplc®系統(tǒng)一同使用，acquity®tqd系統(tǒng)為用戶所有的定量分析提供的分析檢測限分辨率及樣品通量，應(yīng)用范圍包括：生物分析、adme篩選、食品安全、環(huán)境監(jiān)測、臨床學(xué)、法醫(yī)學(xué)等。
特色：
l自動化的系統(tǒng)檢查，用戶界面簡單友好，使用方便，優(yōu)化的ms/ms檢測，滿足zui苛刻的定量分析需求
l數(shù)據(jù)采集速度快，色譜峰面積測量方面的準(zhǔn)確性、重現(xiàn)性好
l可靠耐用的zspray™大氣壓離子源，esi、apci、esci、appi、asap等各種離子源模式可選
l工業(yè)級的多模式檢測能力,一次運(yùn)行時，可同時進(jìn)行多模式的采集
l自動化的儀器優(yōu)化與定量方法開發(fā)工具，精巧的應(yīng)用軟件工具包，適合用戶的特定分析要求。
l快速的數(shù)據(jù)采集能力，（采用t-wave™碰撞池技術(shù)、多模式離子化技術(shù)、極性快速轉(zhuǎn)換技術(shù)）