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HPLC峰值故障排除指南

發(fā)布時(shí)間:2024-04-24
hplc故障排除指南-峰值
峰形問(wèn)題
峰拖尾
與活性硅醇的相互作用
1.使用超高純度硅基(硅膠基質(zhì))固定相
(見1.1)
2.添加堿性流動(dòng)相添加劑(如tea)-超高純度相則不需要
在固定相中與金屬離子螯合
同上
錯(cuò)誤的流動(dòng)相ph值(流動(dòng)相ph值不當(dāng))
1.降低流動(dòng)相ph值以抑制硅烷醇電離(見1.2)
2.增加緩沖液濃度(見1.2)
玻璃料阻塞(篩板堵塞)
1.倒沖洗柱(反沖色譜柱)(見5.2)
2.使用串聯(lián)(在線)過(guò)濾器(見1.3、4.2)
柱無(wú)效(色譜柱失效)
1.倒沖洗柱(反沖色譜柱)(見5.2)
2.更換柱(色譜柱)
死體積未清掃(過(guò)大)
1.盡量減少連接器數(shù)量
2.使用較短的連接管
3.檢查所有配件是否緊固
分裂峰
保護(hù)柱或分析柱入口(進(jìn)樣)端污染
1.拆下保護(hù)柱卡套(卸除保護(hù)柱芯)并進(jìn)行分析-必要時(shí)更換保護(hù)柱
2.倒沖洗(反沖)分析柱(見5.2)
3.對(duì)于頑固殘留(強(qiáng)保留污染物),應(yīng)嘗試再生法(對(duì)色譜柱進(jìn)行再生)(見5.2)
4.更換柱
玻璃料阻塞 (篩板堵塞)
1.倒沖洗柱(反沖色譜柱)(見5.2)
2.使用串聯(lián)(在線)過(guò)濾器(見1.3、4.2)
樣品溶劑與流動(dòng)相不兼容
1.在流動(dòng)相中注入樣品 (用流動(dòng)相溶解樣品)
同時(shí)洗脫第二組分
1.注射前使用樣品清理(進(jìn)樣前先凈化樣品)
2.通過(guò)改變流動(dòng)相或柱相(色譜柱固定相) 來(lái)改變選擇性
柱超載(色譜柱過(guò)載)
1.使用更高容量的固定相
2.增加柱的直徑(增加色譜柱內(nèi)徑)
3.減少樣本(樣品)量
柱中通道的形成 (色譜柱內(nèi)形成通道)
1.更換柱(色譜柱)
2.在建議的色譜柱(色譜柱建議的)ph值范圍內(nèi)操作(見1.5)
柱超載 (色譜柱過(guò)載)
1.注入更少量或更稀釋的樣品溶液(減少進(jìn)樣體積或進(jìn)一步稀釋樣品)
2.使用更高容量的固定相
樣品溶劑與流動(dòng)相不兼容
1.在流動(dòng)相中注入樣品(用流動(dòng)相溶解樣品進(jìn)樣)
低溫
1.增加柱的溫度 (升高柱溫)
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