高壓滅菌的原理是:在密閉的高壓蒸汽滅菌器內(nèi),其中的蒸汽不能外溢,壓力不斷上升,使水的沸點(diǎn)不斷提高,從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1mpa的壓力下,鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下,可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢。
注意:*排除 高壓蒸汽滅菌器內(nèi)空氣,使鍋內(nèi)全部是水蒸氣,滅菌才能*。高壓滅菌放氣有幾種不同的做法,但目的都是要排凈空氣,使鍋內(nèi)均勻升溫,保證滅菌*。常用方法是:關(guān)閉放氣閥,通電后,待壓力上升到0.05mpa時(shí),打開放氣閥,放出空氣,待壓力表指針歸零后,再關(guān)閉放氣閥。關(guān)閥再通電后,壓力表上升達(dá)到0.1mpa時(shí),開始計(jì)時(shí),維持壓力0.1~0.15mpa 20分鐘。
到達(dá)保壓時(shí)間后,即可切斷電源,在壓力降到0.5mpa,可緩慢放出蒸氣,應(yīng)注意不要使壓力降低太快,以致引起激烈的減壓沸騰,使 高壓蒸汽滅菌器中的液體四溢。當(dāng)壓力降到零后,才能開蓋,取出培養(yǎng)基,擺在平臺(tái)上,以待冷凝。不可久不放氣,引起培養(yǎng)基成分變化,以至培養(yǎng)基無法擺斜面 。一旦放置過久,由于鍋爐內(nèi)有負(fù)壓,蓋子打不開,只要將放氣閥打開,大氣壓入,內(nèi)外壓力平衡,蓋子便易打開了。
對(duì)高壓滅菌后不變質(zhì)的物品,如無菌水、栽培介質(zhì)、接種用具,可以延長(zhǎng)滅菌時(shí)間或提高壓力。而培養(yǎng)基要嚴(yán)格遵守保壓時(shí)間,既要保壓*,又要防止培養(yǎng)基中的成分變質(zhì)或效力降低,不能隨意延長(zhǎng)時(shí)間。