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MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞活性操作步驟(背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)為例)

發(fā)布時(shí)間:2024-04-23
無(wú)菌條件下取新生一天的sd大鼠背根神經(jīng)節(jié)。
鏡下去除神經(jīng)根和外膜,放入1ml 0.1%膠原酶中37℃消化30min,每5min搖勻一次。
洗去膠原酶,吹打分散后,接種于預(yù)先涂有l(wèi)-多聚賴(lài)氨酸的96孔培養(yǎng)板中,每孔含100μl無(wú)血清l15培養(yǎng)基,細(xì)胞約800個(gè)。
實(shí)驗(yàn)組分別加入純化的表達(dá)蛋白(分別以不同的蛋白濃度),陰性對(duì)照加入等體積表達(dá)蛋白的溶劑。
37℃ 5%co2培養(yǎng)48hr后,每孔加入10μl mtt,37℃ 5%co2孵育4hr。
加入100μl 20%的sds處理液,37℃孵育20hr。
用el×800微孔酶標(biāo)儀測(cè)定od570值,數(shù)據(jù)分析。
上一個(gè):AF0201DR-075K76L,國(guó)巨抗硫化電阻器
下一個(gè):EMKOESM-4450.1.20.1.1/00.00/0.0.0.0

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