阪崎腸桿菌屬于腸桿菌科,它對所有年齡段的人都易感,尤其是嬰幼兒。本文主要介紹國標中檢測克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)的操作方法。
前增菌和增菌
取檢樣100g(ml)置滅菌錐形瓶中,加入900ml已預熱至44 ℃的緩沖蛋白胨水,用手緩緩地搖動至充分溶解,36 ℃±1 ℃培養(yǎng)18h±2h。移取1ml轉(zhuǎn)種于10ml mlst-vm 肉湯,44 ℃±0.5 ℃培養(yǎng)24h±2h。
分離
輕輕混勻 mlst-vm 肉湯培養(yǎng)物,各取增菌培養(yǎng)物1環(huán),分別劃線接種于兩個阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基平板,顯色培養(yǎng)基須符合 gb4789.28的要求,36 ℃±1 ℃培養(yǎng)24h±2h,或按培養(yǎng)基要求條件培養(yǎng)。
顯色培養(yǎng)基*使用上himedia公司生產(chǎn)的阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基(貨號:mv1577),該培養(yǎng)基適用于從食物、牛奶和奶制品中分離鑒定阪崎克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌),采用無瘋牛病風險的植物蛋白胨取代了動物蛋白胨,產(chǎn)品有g(shù)mp,ce和fda,iso9001,iso13485認證證書,安全可靠,產(chǎn)品符合國標克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)檢驗標準(gb4789.40—2016)相關(guān)要求,是國標中優(yōu)選產(chǎn)品。
挑取至少5個可疑菌落,不足5個時挑取全部可疑菌落,劃線接種于 tsa 平板。25 ℃±1 ℃培養(yǎng)48h±4h。
鑒定
自tsa 平板上直接挑取黃色可疑菌落,進行生化鑒定。克羅諾桿菌屬的主要生化特征見表1??蛇x擇生化鑒定試劑盒或全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)。
表 1 克羅諾桿菌屬的主要生化特征