光葉石楠(photinia glabra)是薔薇科石楠屬常綠灌木或小喬木,是近幾年應(yīng)用較為廣泛的園林樹種。光葉石楠樹冠球形,枝繁葉茂,春季嫩芽紅艷奪目,冬來碧葉片片,地栽于庭院十分相宜,還可孤植、叢植或作基礎(chǔ)綠籬材料,是城鎮(zhèn)綠化、美化的優(yōu)良觀賞樹種⋯。石楠屬植物秋后結(jié)果率很高,一般用種子繁殖。光葉石楠實(shí)生苗童期長,且種子繁殖易發(fā)生性狀分離,無性扦插繁殖是較為理想的方法。但扦插繁殖系數(shù)小,生產(chǎn)水平低,苗木的質(zhì)量、數(shù)量和品種純度等都難以滿足當(dāng)前市場需要。采用組織培養(yǎng)快速繁殖,可在較短時(shí)間內(nèi)獲得大量基因型一致的優(yōu)良苗木,繁殖速度快,經(jīng)濟(jì)效益高,可進(jìn)行周年工廠化生產(chǎn)。目前關(guān)于石楠屬植物的組織培養(yǎng)未見報(bào)道。本研究對光葉石楠的初代培養(yǎng)基及無性增殖培養(yǎng)基進(jìn)行了初步篩選,旨在提高初代培養(yǎng)成功率和增殖培養(yǎng)的增殖系數(shù),為光葉石楠的組織培養(yǎng)工廠化育苗打下技術(shù)基礎(chǔ)。
1 材料與方法
1.i 試驗(yàn)材料以金陵科技學(xué)院園藝試驗(yàn)站引進(jìn)種植的園林樹種光葉石楠實(shí)生苗為試材。
1.2 試驗(yàn)方法
1.2.1 初代培養(yǎng)先將自溫室采集的光葉石楠實(shí)生苗莖段用流水沖洗干凈,在無菌操作臺上用70%酒精表面滅菌30 s,無菌水沖洗2次,再用0.1%升汞水浸泡5 min,后用無菌水沖洗3~4次,然后再加入0.1%升汞浸泡5 min。在無菌條件下,將滅過菌的材料剪成單節(jié)莖段,接種于下述4種誘導(dǎo)培養(yǎng)基上 :ms+ba 1.0 mg/l+naa 0.2 mg/l+蔗糖 3% ;ms+ba 2.0 mg/l+naa 0.2 mg/l+蔗糖 3% ;1/2 ms+ba 1.0 mg/l+naa 0.2 mg/l+ 襞糖3% ;1/2 ms+ba 2.0 mg/l+naa 0 . 2 mg/l+蔗糖 3%。每個(gè)處理接種18枚外植體,20 d后觀察記載外植體生長分化情況。 1.2.2 增殖培養(yǎng)采用正交試驗(yàn)方法,研究了基本培養(yǎng)基、ba、naa、蔗糖等因素對光葉石楠增殖的影響,試驗(yàn)設(shè)4個(gè)因素,每個(gè)因素3個(gè)水平,各因素水平如下:基本培養(yǎng)基分別為ms、1/2ms、1/4ms;ba 分別為0.2 mg/l、0.5 mg/l、1.0 mg/l;naa分別為 0。05 mg/l、0.1 mg/l、0 2 mg/l;蔗糖分別為1% 、 2% 、3% 。正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)如表1所示。
培養(yǎng)基均在121℃ 條件下濕熱滅菌15 min,培養(yǎng)溫度25℃左右,光照強(qiáng)度1 500~2 000 lx,光周期為12 h/d。