goldview核酸染料原理是什么
goldview核酸染料原理
goldview是一種可代替溴化乙錠（eb）的新型核酸染料，采用瓊脂糖電泳檢測(cè)dna時(shí)，goldviewtm與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生很強(qiáng)的熒光信號(hào)，其靈敏度與eb相當(dāng)，使用方法與之*相同。在紫外透射光下雙鏈dna呈現(xiàn)綠色熒光，而單鏈dna呈紅色熒光。goldview不僅能染dna，也可用于染rna。
通過ames實(shí)驗(yàn)、小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)、小鼠精母細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)，致突變性結(jié)果均為陰性；而溴化乙錠（eb）是一種強(qiáng)致癌劑。因此用goldviewtm代替eb不失為一種明智的選擇。
goldview核酸染料使用方法
1. 將100ml瓊脂糖凝膠溶液（濃度一般為0.8%~2%）在微波爐中融化。
2. 加入5µl goldview，輕輕搖勻，避免產(chǎn)生氣泡。
3. 冷卻至不燙手時(shí)倒膠，待瓊脂糖凝膠*凝固后上樣電泳。
4. 電泳完畢在紫外燈下觀察。若使用數(shù)碼相機(jī)照像記錄，則關(guān)閉相機(jī)的閃光燈，放在自動(dòng)檔即可；若使用凝膠成像系統(tǒng)照相，通過調(diào)節(jié)光圈、曝光時(shí)間，選擇合適的濾光片，可得到成像清晰、背景較低的照片。
goldview核酸染料注意事項(xiàng)
1. 膠厚度不宜超過12.5px，膠太厚會(huì)影響檢測(cè)的靈敏度。
2. 加入goldview的瓊脂糖凝膠反復(fù)融化可能會(huì)對(duì)核酸檢測(cè)的靈敏度產(chǎn)生一定影響，但不明顯。
3. 通過凝膠電泳回收dna片段時(shí)，建議使用goldview染色，在自然光下切割dna條帶，避免紫外線與eb對(duì)目的dna產(chǎn)生的損傷，可明顯提高克隆、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)錄等分子生物學(xué)下游操作的效率。
4. 雖然未發(fā)現(xiàn)goldview有致癌作用，但對(duì)皮膚、眼睛會(huì)有一定的刺激，操作時(shí)應(yīng)戴上手套。
電泳結(jié)果顯示gv靈敏度與eb相當(dāng)