是細(xì)胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)中較為常用的是牛血清。根據(jù)血液來源的不同,牛血清可分為:胎牛血清,新生牛血清,小牛血清,成牛血清等。
【胎牛血清】(foetal bovine serum,簡稱fbs):是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發(fā)育因子,非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng),一旦胚胎發(fā)育結(jié)束這些因子自動(dòng)消失。因此8個(gè)月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。
【新生牛血清】(newborn calf serum,簡稱nbcs):0—7天內(nèi)(也有說法是0—30天內(nèi));
【小牛血清】(calf serum):采自出生30天——1年的小牛。
【成牛血清】(adult bovine serum,簡稱abs):采自成年牛收全血后分離得到血清。
血清在細(xì)胞培養(yǎng)過程中的作用,可大致歸為以下幾點(diǎn):
1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
7.參與細(xì)胞凍存。
是許多重組蛋白及藥物生產(chǎn)和研發(fā)用細(xì)胞培養(yǎng)基中的關(guān)鍵成分,對細(xì)胞生長的需要仍難以大規(guī)模的用其它物質(zhì)所代替。研究表明,細(xì)胞通過其粘附蛋白包括纖維連接蛋白(fibronectin,fn)和體外連接蛋白(vitronectin,vn)吸附在人工材料的培養(yǎng)皿上。不同比例的白蛋白和胎牛血清混合溶液等復(fù)雜介質(zhì)對fn和vn通過培養(yǎng)皿表面自組裝單分子膜對細(xì)胞粘附的作用有較大差異。不同胎牛血清的細(xì)胞粘附相關(guān)因子之間的差異所致,胎牛血清的細(xì)胞粘附效應(yīng)可能是影響貼壁細(xì)胞生長、分化、繁殖及凋亡等生命活動(dòng)的關(guān)鍵因素。
因此實(shí)驗(yàn)室中,可以通過對比添加不同血清的的培養(yǎng)液,對于細(xì)胞貼壁的促進(jìn)作用,來初步判斷血清是否符合實(shí)驗(yàn)需要。在實(shí)驗(yàn)過程中,可以用貼壁的細(xì)胞密度,作為評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)。