細(xì)胞：h1944細(xì)胞
中文名稱：人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640培養(yǎng)基 血清：10%fbs（gibco胎牛血清）
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細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作）
1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，pbs 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min）
2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ魕i酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4． 注意培養(yǎng)基 ph 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或者凍存。
支氣管炎病毒(aibv)核酸檢測：
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)用于檢測動(dòng)物體液、咽或泄殖腔試子或肺臟、腎臟、淋巴結(jié)等組織標(biāo)本以及細(xì)胞培養(yǎng)液中禽傳染性支氣管炎病毒(aibv)rna；
實(shí)驗(yàn)原理：選取一對(duì)禽傳染性支氣管炎病毒(aibv)特異性引物和一條特異性熒光探針，應(yīng)用trizol提取rna，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶作用將rna轉(zhuǎn)錄成cdna，后者在taq酶作用下，配以fq-buffer(內(nèi)含mg2+、tris-hcl等)、四種核苷酸單體（dntps）等成分，用一步pcr熒光探針法對(duì)禽傳染性支氣管炎病毒(aibv) rna進(jìn)行擴(kuò)增，從而達(dá)到快速檢測之目的。
適用實(shí)驗(yàn)標(biāo)本：動(dòng)物體液、咽或泄殖腔試子或肺臟、淋巴結(jié)等組織標(biāo)本；病毒細(xì)胞培養(yǎng)液。
實(shí)驗(yàn)標(biāo)本采集：
組織：取發(fā)病動(dòng)物肺、肝、脾、肺、腎、淋巴結(jié)及胰腺等組織約1g，置入1.5ml潔凈ep管。
體液及培養(yǎng)液體：取上述標(biāo)本約1ml，置入1.5ml潔凈ep管。
咽及泄殖腔等試子：用棉試子取咽或泄殖腔分泌物，將試子放入盛有1.0ml pbs(或生理鹽水)的離心管中。
關(guān)鍵詞：培養(yǎng)箱