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小劑量茶堿對(duì)大鼠氣道上皮細(xì)胞nf—kb活性的影響

發(fā)布時(shí)間:2023-09-21
目的:觀察小劑量茶堿是否對(duì)體外培養(yǎng)的哮喘模型大鼠氣道上皮細(xì)胞中nf-kb的活性存在影響。以進(jìn)一步闡明茶堿類藥物抗炎作用和免疫調(diào)節(jié)作用的機(jī)制。方法:雄性wistar大鼠隨機(jī)分為2組,對(duì)照組(5只),哮喘模型組(15只);模型組以卵清蛋白致敏和激發(fā),建立哮喘模型。體外培養(yǎng)哮喘模型組和對(duì)照組大鼠的氣道上皮細(xì)胞。分別觀察加入脂多糖(lps)刺激前后nf-kb活性的變化;在哮喘模型組大鼠的氣道上皮細(xì)胞中加入不同濃度的氨茶堿與lps(1μg.ml^-1)共同培養(yǎng)4h后,以及加入同一濃度氨茶堿和lps(1μg.ml^-1)共同培養(yǎng)不同時(shí)間后nf-kb活性的變化。nf-kb活性采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè),以細(xì)胞核染色作為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn),以細(xì)胞核陽(yáng)性的百分比表示nf-kb的活性。結(jié)果:經(jīng)lps刺激前,對(duì)照組和哮喘組大鼠氣道上皮細(xì)胞胞漿nf-kb均有一定程度的表達(dá)。細(xì)胞核表達(dá)的細(xì)胞,哮喘組為(6.4%±1.2)%,而對(duì)照組為(4.7%±1.7)%,二者相比較,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。在哮喘組大鼠上皮細(xì)胞中加入lμg.ml^-1脂多糖及各種濃度氨茶堿共同培養(yǎng)4h后,nf-kb活性均有所下降。0μg.ml^-1(不加茶堿)組,5μg.ml^-1組,10μg.ml^-1組,15μg.ml^-1組nf-kb活性分別為(84.3±3.2)%,(82.8±2.5)%,(78.4±6.3)%,(75.6±4.1)%。除5μg.ml^-1組與0μg.ml^-1(不加茶堿處理)組之間的nf-kb活性,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)外,其余各組間兩兩比較,差異均有顯著性(p0.05),哮喘大鼠氣道上皮細(xì)胞中的基礎(chǔ)nf-kb活性較對(duì)照組高。結(jié)論:茶堿類藥物可抑制體外培養(yǎng)的大鼠氣道上皮細(xì)胞中的nf-kb的活性,并可能呈濃度依賴性,而與作用時(shí)間無(wú)明顯關(guān)系。完成機(jī)構(gòu):武漢大學(xué)人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科,武漢430060
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