細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，是細(xì)胞生物學(xué)研究的重要方向，需要以細(xì)胞培養(yǎng)為基礎(chǔ)。ausbian進(jìn)口胎牛血清，澳洲血源，內(nèi)毒素含量≤3eu/ml，助力細(xì)胞學(xué)研究。
wnt信號(hào)是一個(gè)基本的信號(hào)級(jí)聯(lián)，在人類發(fā)育和發(fā)育中起著至關(guān)重要的作用。異常的wnt信號(hào)經(jīng)常與各種癌癥密切相關(guān)。wnt信號(hào)是由分泌的脂質(zhì)修飾信號(hào)糖蛋白wnt與其卷曲(fzd)受體及其共受體之間的相互作用觸發(fā)的。 wnt在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(er)中合成，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的膜結(jié)合o-?；D(zhuǎn)移酶porcupine (porcn)將單不飽和棕櫚油酸酯部分(pam)轉(zhuǎn)移到wnt蛋白發(fā)夾2上的保守絲氨酸殘基上。先前的一項(xiàng)研究表明，棕櫚?；瘜?duì)于wnt的分泌是很重要的，關(guān)鍵絲氨酸的突變或porcn活性的喪失都會(huì)導(dǎo)致wnt滯留在er中。脂化后，膜蛋白wntless (wls)利用其胞外結(jié)構(gòu)域和跨膜區(qū)域與修飾的wnt結(jié)合。這種相互作用促進(jìn)了wnt在細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)輸。
已經(jīng)鑒定出19種人類wnt配體通過旁分泌和自分泌系統(tǒng)激活不同的信號(hào)通路人類wnt蛋白含有至少22個(gè)半胱氨酸殘基，這些殘基形成多個(gè)二硫鍵，有助于wnt的穩(wěn)定性和折疊。脂化wnt配體由于其疏水性，通常在水環(huán)境中表現(xiàn)出低溶解度，因此在wnt生產(chǎn)過程中需要蛋白質(zhì)伴侶。在所有后生動(dòng)物中，wnt脂化和細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的關(guān)鍵過程分別由porcn和wls兩種膜蛋白介導(dǎo)。這意味著存在一個(gè)支配wnt生產(chǎn)的普遍原則。
wnt分泌的一種可能模式涉及直接釋放到細(xì)胞外空間。
首先，wnt-wls復(fù)合物通過高爾基體從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)移動(dòng)到質(zhì)膜。一旦wnt- wls復(fù)合物到達(dá)細(xì)胞表面，wnt分子就與排泄它們的細(xì)胞上的受體結(jié)合(自分泌信號(hào))或與鄰近細(xì)胞結(jié)合(旁分泌信號(hào))。這一過程可能涉及wnt分子向各種實(shí)體的轉(zhuǎn)移，如細(xì)胞表面蛋白聚糖和可溶性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。
另一種模型表明，wnt-wls復(fù)合物在定位到質(zhì)膜后，經(jīng)歷內(nèi)吞作用和隨后在內(nèi)體腔室內(nèi)解離。這就允許wnt被裝載到外泌體上進(jìn)行分泌關(guān)于wnt與wls解離的各種假設(shè)提出，低ph調(diào)節(jié)wnt的釋放，特定脂質(zhì)與wnt在wls中的棕櫚油基部分競(jìng)爭(zhēng)，或者膜曲率的改變促進(jìn)了wnt的釋放。
然而，有限的實(shí)驗(yàn)證據(jù)支持這些提出的機(jī)制；因此，wnt從wls釋放的分子決定因素仍然難以捉摸。
近日，科研人員發(fā)現(xiàn)鈣網(wǎng)蛋白(calr)是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中wnt蛋白的糖聚糖伴侶。
相關(guān)研究發(fā)表在《cell》上，文章標(biāo)題為：“molecular basis of wnt biogenesis, secretion and wnt7 specific signaling”。
研究結(jié)果還表明，將磷脂摻入wls可以增強(qiáng)wnt蛋白的募集。在wls載脂蛋白狀態(tài)下，tms 6-7的構(gòu)象發(fā)生改變，阻斷了wls和wnt蛋白中中心磷脂的結(jié)合位點(diǎn)，提示脂質(zhì)介導(dǎo)wnt釋放的機(jī)制。此外，我們已經(jīng)確定了與wnt7a結(jié)合的reck的結(jié)構(gòu)，揭示了reck的cc4結(jié)構(gòu)域?qū)τ诮Y(jié)合wnt7a激活wnt配體特異性信號(hào)至關(guān)重要。