1、外植體的選取及預處理
⑴外植體選?。哼x取生長健壯、已發(fā)芽、長勢較好、無病害的植物帶芽的枝條作為外植體。
⑵材料預處理：取帶芽的枝條，用洗衣粉適量沖洗，然后扳取或用清潔剪刀剪取帶芽部位（約1cm×1cm大?。斞亢鸵秆?、大芽和小芽分開。繼續(xù)用洗衣粉清洗10分鐘，清洗時需不停晃動。再用自來水沖洗干凈，置空培養(yǎng)瓶備用。
2、外植體消毒
⑴蒸餾水沖洗：外植體置于已殺菌開機的超凈工作臺上，新潔爾滅洗液消毒雙手，用無菌蒸餾水清洗外植體2-3次，需晃動。
⑵酒精消毒：75%酒精倒入裝外植體的容器內，消毒外植體30-60s，時間長短視植物材料情況而定。動作一定迅速，需晃動。然后將酒精倒去。
⑶升汞消毒：1%生汞倒入裝外植體的容器內，消毒外植體5-10min，時間長短視情況而定。需晃動，在最后3min靜置，升汞注滿容器，將已灼燒的鑷子放入容器升汞內浸泡。
⑷蒸餾水清洗：用鑷子將外植體取出，放入另一無菌蒸餾水瓶中清洗，反復清洗4次。
⑸莖尖的剝離：用灼燒冷卻的鑷子和剪刀對外植體進行處理，剝離外植體材料芽外部小葉片，露出尖端生長點和2-3片葉原基部分，將此部分剪下做培養(yǎng)材料。再用無菌蒸餾水清洗3-4次。
⑹接入培養(yǎng)基：培養(yǎng)基瓶放入工作臺內，將剝離的材料分別用消毒過的鑷子放入培養(yǎng)瓶內，蓋上瓶蓋，置培養(yǎng)籃內，寫上培養(yǎng)時間、操作人及培養(yǎng)品名，入培養(yǎng)室培養(yǎng)。