羅丹明123的使用！
羅丹明123 (rhodamine 123、羅丹明123, rh 123)是一種可以通過細(xì)胞膜的選擇性染色活細(xì)胞線粒體的熒光染料，呈黃綠色熒光，多用于檢測線粒體膜電位，也常用于細(xì)胞凋亡檢測。它可以快速通過細(xì)胞膜，僅需幾分鐘就可以被具有活性的線粒體所俘獲，并且對細(xì)胞沒有任何毒性。rhodamine 123還用于對許多種細(xì)胞進(jìn)行染色，包括植物細(xì)胞和細(xì)菌，由于細(xì)胞內(nèi)atp的量與rh123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性，因此rh123也被用于檢測細(xì)胞內(nèi)的atp。
溶解性：
溶于乙醇，參考濃度1mg/ml。
溶液的配制
用dmso溶解，終濃度為1-5 mm。溶液分裝，避光保存于-20 oc。
羅丹明123使用方法
1. 用載玻片準(zhǔn)備細(xì)胞。細(xì)胞數(shù)目應(yīng)為 5×104～5×105個(gè)/ml。
2. 孵育該載玻片，用 pbs或hank’s 液洗滌細(xì)胞。
3. 用培養(yǎng)基稀釋 rh123母液以制備 1～20µm rh123緩沖液。具體工作濃度取決于細(xì)胞類型和細(xì)胞濃度。
4. 將 rh123緩沖液加入載玻片并在37℃下孵育 30 分鐘至 1 小時(shí)。
5. 去除 rh123 緩沖液并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞（洗滌細(xì)胞后為了固定，加入 10%福爾馬林緩沖液并孵育 15～20 分鐘，接著用 pbs洗滌）。
6. 用帶有熒光素濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
關(guān)鍵詞：熒光顯微鏡