一、細胞培養(yǎng)基發(fā)展歷史
細胞體外培養(yǎng)初期使用的培養(yǎng)基，都是天然培養(yǎng)基，也就是組織提取物或者體液，如血漿、血清、淋巴液、胚胎浸出液等，直到20世紀50年代parke、eagle等人，設(shè)計出化學(xué)成分明確的合成培養(yǎng)基：mem培養(yǎng)基和dmem培養(yǎng)基，這兩種培養(yǎng)基直到現(xiàn)在還被人們廣泛使用。在此基礎(chǔ)上，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)，在合成培養(yǎng)基中添加血清，可以使細胞維持更高的活細胞密度和更長的培養(yǎng)時間。隨著血清成分的不斷明確，科學(xué)家們逐步開始研發(fā)無血清培養(yǎng)基，減少血清對細胞培養(yǎng)的影響。
二、細胞培養(yǎng)基組成成分及功能
1、氨基酸
氨基酸是培養(yǎng)基中主要的氮源物質(zhì)，也是重要的能源物質(zhì)。
2、維生素
一般培養(yǎng)基中含有的維生素有：①脂溶性維生素：如a、d、e、k等；②水溶性維生素：如b、c、葉酸、煙酰胺等。培養(yǎng)基中添加維生素可以適合更多細胞系的生長。
3、無機鹽
無機鹽是維持培養(yǎng)基滲透壓平衡的主要物質(zhì)，它還可以調(diào)節(jié)細胞膜功能，無機鹽主要包括：ca2+、mg2+、cl-、na+、k+等。
4、碳水化合物
細胞培養(yǎng)基中的碳水化合物通常被用作細胞的能量來源，常用的有葡萄糖、丙酮酸鈉等。
5、脂類
脂類物質(zhì)作為有機能量的來源，可以滿足細胞新陳代謝的需求，也可以支持細胞生長和存活，培養(yǎng)基中的脂類物質(zhì)主要有：膽固醇、乙醇胺、亞油酸等。
6、激素
激素類物質(zhì)主要包含：胰島素、生長激素、腎上腺素等，可以促進細胞生長、提高細胞增殖能力，
7、微量元素
細胞培養(yǎng)基中微量元素主要有：銅、錳、鋅、硒等，這些微量元素對細胞無蛋白長期穩(wěn)定培養(yǎng)具有重要作用。
8、特殊添加物
蛋白水解物、酵母水解物等這些特殊添加物可以起到抗氧化劑、抗剪切劑、刺激抗體表達等作用。
9、緩沖體系
通常細胞培養(yǎng)基中會添加hepes、磷酸鹽等緩沖物質(zhì)，可以調(diào)節(jié)培養(yǎng)基ph、滲透壓等。
三、培養(yǎng)基種類
1、bme細胞培養(yǎng)基：適用于各種傳代細胞系。
2、mem細胞培養(yǎng)基：適合多種細胞單層生長。
3、dmem細胞培養(yǎng)基：根據(jù)葡萄糖含量可以分為低糖和高糖2種類型，低糖適用于培養(yǎng)貼壁依賴性細胞，高糖適用于高密度懸浮細胞培養(yǎng)。
4、dmem/f12細胞培養(yǎng)基：適用于原代細胞培養(yǎng)及難培養(yǎng)細胞。
5、m199細胞培養(yǎng)基：適用于培養(yǎng)多種種屬來源的細胞及能轉(zhuǎn)染的細胞。
6、imdm細胞培養(yǎng)基：適用于高密度細胞的快速增殖培養(yǎng)。
7、rpmi-1640細胞培養(yǎng)基：適用于懸浮細胞、淋巴細胞等細胞培養(yǎng)。
8、hamf10細胞培養(yǎng)基：適用于克隆化培養(yǎng)。
9、mccoy5a細胞培養(yǎng)基：適用于原代細胞培養(yǎng)、淋巴細胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)的細胞。
10、l15細胞培養(yǎng)基：適用于快速增殖的腫瘤細胞培養(yǎng)。
四、培養(yǎng)基保存方法
1、液體培養(yǎng)基
液體培養(yǎng)基應(yīng)于2-8℃冰箱保存，實驗前放入37℃預(yù)熱。
2、干粉培養(yǎng)基
2-8℃冰箱避光保存。