須毛癬菌lamp試劑盒實驗要點:
1.ctab 溶液在低于15℃時會析出沉淀,因此在將其加入冷凍的植物材料中之前必須預熱。
2.在最適條件下,dna—ctab 沉淀呈白色纖維狀,很容易一下子就從溶液中鉤出。不過,某些植物種的dna 沉淀中可能含有雜質,特別是多糖,使dna 沉淀呈絮狀或膠狀,這種情況下可能需要稍事離心才能得到dna. —ctab 沉淀。
3.飽和酚雖然可有效地使蛋白質變性,但酚不能*抑制rna 酶的活性,而且酚可以溶解含poly(a)的mrna。如果用ben酚和氯仿的混合液,可減輕這兩種現象,同時可加入適量的異戊醇(ben酚—氯仿—異戊醇=25:24:1),異戊醇的作用是消泡,并使蛋白質層緊密,使水相和有機相分層較好。 細菌的培養(yǎng)和收集 將含有質粒pbs 的dh5α菌種接種在lb 固體培養(yǎng)基(含50μg/ml amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24 小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml lb 液體培養(yǎng)基(含50μg/ml amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12 小時至對數生長后期。小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒dna 十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得dna 有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
操作流程:
1. 根據要保存的各樣本的體積,計算出所需rnawait用量。rnawait的用量應當是組織體積的10倍(如100mg組織約用1ml rnawait);離心收集2×106細胞rnawait的用量是1ml。
2. 將rnawait按需要量分裝入自備保存管中;
3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀,立即*浸入rnawait中。組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過厚則rnawait不能有效滲入,組織中間部位的rna不能受到保護。較小的組織(如大鼠的腎臟、脾臟,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入rnawait。
4. 保存時先將樣本浸入rnawait后置4℃冰箱過夜(4℃過夜是必需的,這樣可使rnawait*滲入到組織中),然后轉移到-20℃冰箱(rnawait在-20℃時仍為液態(tài),有結晶析出,是正常情況);或者在4℃冰箱過夜后,從rnawait中取出組織塊,轉移到-80℃冰箱。在rnawait中保存的標本,反復凍融至室溫20次不影響rna的質量。
重組人 ccl14 / hcc-1 / hcc-3 蛋白 (his 標簽)
重組人 ccl21 / 6ckine 蛋白
重組人 cxcl9 / mig / c-x-c motif chemokine 9 蛋白
重組小鼠 cxcl9 / mig / c-x-c motif chemokine 9 蛋白
重組食蟹猴 cxcl12 / sdf-1 蛋白 (fc 標簽)
重組人 cxcl1 / mgsa / nap-3 蛋白 (his & nusa 標簽)
重組食蟹猴 cxcl13 / bca-1 / blc 蛋白 (his 標簽)
重組小鼠 ccl6 / c-c motif ligand 6 蛋白 (his 標簽)
重組小鼠 ccl8 / mcp-2 蛋白 (his & nusa 標簽)
重組人 ccl17 / tarc / scya17 蛋白
重組人 ccl15 / mip-5 / mip-1 delta 蛋白 (aa 22-113, his 標簽)
重組小鼠 cxcl2 / gro2 / mip-2 蛋白 (his & sumo 標簽)
重組人 ccl17 / tarc / scya17 蛋白 (his 標簽)
重組人 cxcl1 / mgsa / nap-3 蛋白 (his & sumo 標簽)
重組人 ccl8 / mcp-2 蛋白 (sumo 標簽)
重組人 mcp-3 / ccl7 蛋白 (his 標簽)
重組小鼠 cxcl16 / sr-psox 蛋白 (his 標簽)
重組人 ccl5 / rantes 蛋白 (his & mucin 標簽)
重組人 il-8 / cxcl8 蛋白 (aa 6-77)
重組人 il-8 / cxcl8 蛋白 (aa 6-77, fc 標簽)
重組人 il-8 / cxcl8 蛋白 (aa 1-77)
重組人 il-8 / cxcl8 蛋白 (aa 1-77, fc 標簽)
重組人 cxcl4 / pf4 蛋白
重組人 cxcl12 / sdf1b 蛋白 (fc 標簽)