紫外可見分光光度計(jì)是基于紫外可見分光光度法原理，利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進(jìn)行分析的一種分析儀器，主要由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號(hào)處理器等部件組成。
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同，因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。
紫外可見分光光度計(jì)的類型很多，基本可以歸納為三種類型：單光束分光光度計(jì)、雙光束分光光度計(jì)和雙波長分光光度計(jì)。
單光束分光光度計(jì)
其光路經(jīng)單色器分光后的一束平行光，輪流通過參比溶液和樣品溶掖，以進(jìn)行吸光度的測定。這種類型的分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)簡單，操作方便，維修容易，適用于常規(guī)分析。國產(chǎn)722型，751型、724型、英國sp500型以及 backmandu-8型等均屬于此類光度計(jì)。
雙光束分光光度計(jì)
其光路經(jīng)單色器分光后經(jīng)反射鏡(m1)分解為弧度相等的兩束光，一束通過參比池，另一束通過樣品池。光度計(jì)能自動(dòng)比較兩束光的強(qiáng)度，此比值即為試樣的透射比，經(jīng)對(duì)數(shù)變換將它轉(zhuǎn)換成吸光度并作為波長的函數(shù)記錄下來。雙光束分光光度計(jì)一般都能自動(dòng)記錄吸收光譜曲線。由于兩束光同時(shí)分別通過參比池和樣品他，還能自動(dòng)消除光源強(qiáng)度變化所引起的誤差。這類儀器有國產(chǎn)710型、730型和740型，日立220系列，島津-210，英國unicamsp-700等等。
雙波長分光光度計(jì)
其基本光路由同一光源發(fā)出的光被分成兩束，分別經(jīng)過兩個(gè)單色器，得到兩束不同波長的單色光;再利用切光器使兩束光以一定的頻率交替照射同一吸收池，然后經(jīng)過光電倍增管和電子控制系統(tǒng)，zui后由顯示器顯示出兩個(gè)波長處的吸光度差值δa(δa=a1-a2)。
雙波長分光光度計(jì)的優(yōu)點(diǎn)在于，對(duì)于多組分混合物、混濁試樣(如生物組織液)的分析，以及存在背景于擾或共存組分吸收干擾的情況下，利用雙波長分光光度法，往往能提高方法的靈敏度和選擇性。利用雙波長分光光度計(jì)，能獲得導(dǎo)數(shù)光譜。通過光學(xué)系統(tǒng)轉(zhuǎn)換，使雙波長分光光度計(jì)能很方便地轉(zhuǎn)化為單波長工作方式。如果能在兩波長處分別記錄吸光度隨時(shí)間變化的曲線，還能進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究。