elisa試劑盒的選擇問題不容忽視,新手該如何選elisa試劑盒呢?以下是科研elisa試劑盒選擇的幾條準則,供大家參考!
一、根據(jù)實驗物種及待檢樣品性質來選擇elisa
如果實驗君的實驗樣品為人、小鼠或大鼠樣品,那么要選擇一個合適的試劑盒相對容易,但如果您的實驗樣品來源于其他物種如雞、牛、猴等,則市面上能提供的試劑盒種類卻很少。且不可輕信能提供近萬種試劑盒,覆蓋多物種的供應商。但如果又非要檢測這些物種的指標時,要對待檢物(如有種屬差異性)進行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應數(shù)據(jù)。對于樣品類型而言,一般的商業(yè)化試劑盒都經(jīng)過血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清液的驗證。在選擇試劑盒時,要詳細閱讀說明書,比如血漿樣本抗凝劑的使用是否與試劑盒兼容。另外,在某些情形下樣品中會存在干擾因素比如溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(hama)、細胞培養(yǎng)上清中含胎牛血清等。因此需根據(jù)樣品來選擇試劑盒,必要時還要根據(jù)樣本來適當優(yōu)化?;蛟跇悠肥占埃乳喿x一些可靠供應商試劑盒的說明書或直接咨詢。如果您的樣品為組織或細胞裂解物,則需要更謹慎的選擇試劑盒。市面上大多數(shù)的商業(yè)化試劑盒沒有經(jīng)過多種來源組織樣本的驗證。這需要實驗君能理解不是所有試劑盒所用的抗體對,都能特異的從一堆裂解物蛋白中特異檢出您的目的蛋白,還要考慮組織樣品的基質效應(matrix effect)等。但如果實驗君要了解組織樣品的制備問題,我們另起一文來總結。
二、細致比較試劑盒關鍵性技術參數(shù)
elisa試劑盒的關鍵技術參數(shù)包括板內差異性、板間差異性、批間差異性、重復性、特異性及交叉反應性、回收率等。如果實驗君經(jīng)常開展elisa實驗,建議使用同一廠家的試劑盒,這樣可盡量保證數(shù)據(jù)的重復性(當然前提是實驗條件的一致性)。對于科研用的定量elisa試劑盒,不同的生產(chǎn)廠家使用的抗體對、酶以及底物、生產(chǎn)工藝和研發(fā)實力不盡相同,自然不同廠家試劑盒測出的數(shù)據(jù)會有差異。
三、根據(jù)樣品中檢測物水平來選擇試劑盒
如果實驗君對于樣品中待檢物的水平?jīng)]有任何可參考的數(shù)據(jù),選擇寬動力學檢測范圍的試劑盒。如果樣品中待檢物的含量很低,建議選擇高靈敏度的試劑盒。為了降低基質效應,有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。如果樣品中待檢物含量遠超過試劑盒的檢測范圍(標曲范圍), 也需做適當?shù)谋稊?shù)稀釋。在zui后計算結果時,需乘以相應的稀釋倍數(shù)。
四、供應商資質評估
縱觀國內外elisa試劑盒供應商,“柏君”估計至少100余家。有些供應商可提供數(shù)百種常用指標elisa,然而有些供應商則聲稱可提供數(shù)千種甚*萬種指標的試劑盒,但質量參差不齊,更有濫竽充數(shù)禍害科研之輩。那如果選擇供應商呢?
1、從同行或實驗室同僚了解供應商的口碑,售前售后的處理情況。
2、查詢供應商的wang站詳細了解相關指標,可查詢這些指標是否已經(jīng)開發(fā)出特異性抗體?如果查遍連抗體都還不可獲取,又如何開發(fā)出elisa試劑盒呢? 第3、文獻引用是*,尤其是sci期刊文章對供應商產(chǎn)品的引用。
4、了解供應商的研發(fā)歷史和品牌史,很多供應商頻頻更換公司名或更換公司注冊地,其中名堂實驗君應該能悟出。不要迷信國外“品牌”,國外“品牌”不代表是。很多打著國外旗號的公司,其實就是空殼的皮包公司,從oem劣質產(chǎn)品。國外供應商也有售后不給力的時候。
五、根據(jù)樣本可獲得性來選擇試劑盒
通常而言,商業(yè)化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供應商的試劑盒對樣品的用量要求可少至10ul。如果您的樣品很珍貴或較難獲取,則需要認真考慮試劑盒對樣品用量的要求。如果樣品量少,且要做多因子檢測時更需謹慎。
六、經(jīng)費預算
說了半天,還是要看課題經(jīng)費的預算。沒經(jīng)費咋搞科研呢?*的一般質量可靠,文獻引用多。但品牌由于進口和運輸?shù)瘸杀据^高,因此售價也較高。其實國產(chǎn)品牌也是不錯的選擇, 因省去不少物流和報關費用,與國外進口試劑盒相比價格上有比較大的優(yōu)惠,而且能提供比較靈活的包裝規(guī)格, 如48tests小包裝,非常適合中國國情。國內elisa品牌靠譜的還是有4到5家,這里就不做硬廣告了,實驗君可以上丁香通、小木蟲等行業(yè)資訊平臺或論壇等了解。當然您可以隨時聯(lián)xi“柏君”為您排憂解難。
七、認清訂購渠道
不論是還是國內品牌,都需要在訂購前先與生產(chǎn)廠商詳細溝通產(chǎn)品細節(jié)(比如酶標板是否可拆卸),了解售前售后技術服務能力等。然后咨詢其訂購渠道,比如直接向廠家訂購或通過中國區(qū)或省級*代理商經(jīng)銷商訂購。謹防jia冒產(chǎn)品,花了錢是小事,實驗數(shù)據(jù)的可靠性、真實性是大事呀,耽誤了時間延遲了畢業(yè)更是不無處訴苦! 空留傷心淚。選擇正規(guī)渠道,選擇品質!早發(fā)高質量paper!