科研實(shí)驗(yàn)中我們經(jīng)常需要配制各種濃度的試劑。例如細(xì)胞實(shí)驗(yàn)一般需要加入小分子激動劑/抑制劑;分子轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)一般會加入抗生素;免疫實(shí)驗(yàn)需要加入免疫刺激物/免疫佐劑等。這些昂貴的試劑濃度一旦計(jì)算錯誤,不僅挑燈夜戰(zhàn)得來的數(shù)據(jù)毀于一旦,早日發(fā)文的愿望也隨之破滅,可謂一失足成千古恨。今天小愛就為大家解決這一難題,讓我們學(xué)會快速換算試劑濃度,擺脫科研失誤。
案例一
抑制劑儲存液配制
我們買來的小分子抑制劑一般是凍干粉,需要把它配制成溶液。首先,我們應(yīng)該知道藥物的分子量、溶解度以及規(guī)格。如果是毫克級小包裝,一般不需要稱量分裝,直接在原瓶中溶解配成儲存液。
以rock抑制劑y-27632為例,產(chǎn)品信息如下:
cas號
規(guī)格
分子量
可溶性/溶解性
146986-50-7
5mg
247.34
dmso:≥ 32mg/ml (129.38mm)
該藥物推薦溶劑dmso,同時,最大只能配成129.38mm的儲存液。這一點(diǎn)非常重要。有些人沒有注意藥物溶解性,直接在非水溶性藥物中加入pbs配置,結(jié)果藥物不溶,“損失慘重”。
假如我們需要配置10mm儲存液,計(jì)算公式如下:
質(zhì)量(mg)= 濃度(mm)x 體積(l)x 分子量 (1)
5(mg)= 10(mm)x ?(l)x 247.34
即向含5mg y-27632的原瓶中加入2.02ml dmso,即可配制成10mm溶液。(注:此處要預(yù)估原瓶的容量,如果原瓶容量小于2 ml,應(yīng)考慮配置更大濃度的儲存液,如20mm,加入1.01 ml dmso)。
此外,我們也會經(jīng)常遇到質(zhì)量濃度和摩爾濃度單位轉(zhuǎn)換,同樣以10mm y-27632為例:
10mm=10mmol/l,化合物分子量為247.34,即247.34g/mol=247.34mg/mmol
10mmol/l x 247.34mg/mmol = 2473.4mg/l= 2.4734mg/ml
即10mm y-27632溶液相當(dāng)于2.4734mg/ml
濃度快速換算法則:
1)mm轉(zhuǎn)換mg/ml,摩爾濃度數(shù)值乘以分子量再除以1000;
2)mg/ml轉(zhuǎn)換mm,質(zhì)量濃度數(shù)值除以分子量再乘以1000。
案例二
抑制劑儲存液稀釋
我們買來抑制劑的凍干粉,配制儲存液的濃度為10mm,如果需要使用終濃度為25um進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn),需要加入多少抑制劑儲存液呢?記住下面這個稀釋公式就可以了:
起始濃度 x 起始體積 = 最終濃度 x 最終體積
c1(mm) x v1(ml)= c2(mm)x v2(ml) (2)
首先,
注意單位,我們假設(shè)最終體積為2ml,代入公式:
10(mm)x v1(ml)= 0.025(mm)x 2(ml)
即我們需要吸取5ul的儲存液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。
案例三
百分比濃度換算
我們在使用二硫蘇糖醇(dtt)做實(shí)驗(yàn)時,會遇到這樣的問題:已發(fā)表的文獻(xiàn)中使用0.1%的dtt溶液,而你購買的dtt為1mol/l的儲存液,那么這該如何換算呢?請聽小愛為您解答:
dtt的分子量為154,即154g/mol,儲存液換算成質(zhì)量濃度c1為
154g/mol x 1mol/l = 154g/l
假設(shè)需配制1l的0.1%dtt溶液,即v2 = 1l = 1000ml
0.1% dtt溶液為0.1g/100ml = 1g/1000ml = 1g/l,即c2 = 1g/l
再使用公式(2)c1 x v1 = c2 x v2 可得:
154(g/l)x v1(l)= 1(g/l)x 1(l)
v1 = 6.5ml,即吸取6.5ml 1mol/l的dtt儲存液,加入993.5ml稀釋液中即可獲得0.1%的dtt溶液。
如果我們購買的是固體二硫蘇糖醇,配制0.1%的dtt溶液方法如下:精確稱取1g二硫蘇糖醇,用水定容至1000ml即可。
dl-二硫蘇糖醇科普
dl-二硫蘇糖醇(dl-dithiothreitol,dtt)具有很強(qiáng)的還原性,其還原性很大程度上是由于其氧化狀態(tài)六元環(huán)(含二硫鍵)的構(gòu)象穩(wěn)定性。dtt有抗氧化作用,它能保護(hù)酶分子上的還原性基團(tuán),維持還原性環(huán)境,穩(wěn)定酶的活性。dtt中還含有一定rna酶抑制劑,具有抑制rna酶活性的作用。具有巰基乙醇相似的作用,但dtt的刺激性氣味要小很多,毒性也比巰基乙醇低很多。用作蛋白質(zhì)巰基保護(hù)劑和蛋白質(zhì)二硫鍵的裂解和順序分析。
dl-二硫蘇糖醇應(yīng)用:
※ 作為牛奶中主要過敏原αs1-酪蛋白的還原和烷基化反應(yīng)物之一;
※ 作為精子去膜和再激活培養(yǎng)基的一個組分;
※ 因硫醇可有效保護(hù)生物催化劑的活性位點(diǎn)而維持酶的穩(wěn)定性;
※ 作為還原劑用于測試n-乙基馬來酰亞胺與巰基反應(yīng)的特異性。
產(chǎn)品信息:
貨號
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨期
abs9226
dtt溶液(1mol/l)
5ml
現(xiàn)貨
abs47002083
dl-二硫蘇糖醇(>98%,br級)
5g/25g
現(xiàn)貨
abs42017588
dl-二硫蘇糖醇(>97%)
1g/5g
現(xiàn)貨
小分子抑制劑產(chǎn)品推薦:
貨號
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨期
abs810012
brefeldin a
10mg/25mg
現(xiàn)貨
abs812852
pmsf
50mg/100mg/200mg
現(xiàn)貨
abs810003
u0126
5mg/10mg/25mg/50mg/100mg
現(xiàn)貨
abs810466
cisplatin
5mg/50mg
現(xiàn)貨
abs810001
ly 294002
10mg/25mg/100mg
現(xiàn)貨
abs812864
y-27632
5mg/10mg/50mg
現(xiàn)貨
abs812972
poly(i:c)
10mg/50mg
1-2周
abs810008
sp600125
10mg/50mg
現(xiàn)貨
abs810744
erastin
5mg/10mg/50mg/100mg
現(xiàn)貨
abs817419
suramin sodium salt
25mg
現(xiàn)貨
abs817348
ibmx
25mg/100mg
現(xiàn)貨
abs810006
staurosporine
5mg/25mg
現(xiàn)貨
abs812846
geneticin (g418 sulfate)
250mg/500mg
現(xiàn)貨
abs810030
rapamycin
5mg/10mg/100mg/1g
現(xiàn)貨
abs810575
3-methyladenine
25mg/50mg/200mg/500mg
現(xiàn)貨
abs819421
prostaglandin e2
5mg/50mg
現(xiàn)貨
abs817025
capsaicin
25mg/50mg/100mg
現(xiàn)貨
abs810009
sb202190(fhpi)
5mg/50mg
現(xiàn)貨
abs810016
cyclosporin a
5mg/25mg/50mg
現(xiàn)貨
abs810010
pd 98059
5mg/10mg/50mg
現(xiàn)貨
abs819747
nigericin sodium salt
5mg/10mg/25mg
現(xiàn)貨
abs812975
monensin sodium salt
25mg/100mg
現(xiàn)貨
abs810716
doxorubicin hydrochloride
5mg/50mg
現(xiàn)貨
abs810020
paclitaxel
5mg/10mg/25mg/50mg/100mg
現(xiàn)貨
abs810481
sb-431542
5mg/10mg/50mg
現(xiàn)貨
abs810640
y-27632 2hcl
5mg/50mg
現(xiàn)貨
abs812033
leupeptin hemisulfate
5mg/10mg/25mg
現(xiàn)貨
abs817902
pepstatin a
10mg/25mg/50mg/100mg
現(xiàn)貨
abs811913
gsmtx4
1mg/5mg
現(xiàn)貨
abs814916
gastrin i (human)
1mg/5mg
現(xiàn)貨
abs817694
a-83-01
5mg/10mg/25mg/50mg
現(xiàn)貨
abs810052
chir-99021(ct99021)
5mg/25mg
現(xiàn)貨
abs810473
dapt
5mg/10mg/50mg
現(xiàn)貨
abs810530
dorsomorphin free base
5mg/50mg
現(xiàn)貨
abs810050
forskolin
5mg/25mg/100mg
現(xiàn)貨
abs816969
nicotinamide
50mg/100mg/200mg/500mg
現(xiàn)貨
abs810009
sb202190(fhpi)
5mg/50mg
現(xiàn)貨
溫馨提示:absin所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究,請勿藥物、家用或其他用途。
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