做免疫組化時(shí)，一般都會(huì)封閉。以減少假陽(yáng)性。
封閉主要是用于封去切片上一些非特異性吸附。用一種非特異性的蛋白，把那些容易吸附蛋白的空間和位點(diǎn)占起來(lái)，這樣，加上抗體時(shí)，抗體只能與對(duì)應(yīng)的抗原去結(jié)合了。
一般封閉可以用5%的bsa，這個(gè)價(jià)格便宜，而且效果還行。但理論上，用與二抗同來(lái)源的正常血清會(huì)更好。
比如，一抗為國(guó)產(chǎn)的兔抗il-2，二抗用標(biāo)記的羊抗兔igg。那么，封閉血清就選擇與二抗同來(lái)源的正常羊血清（一般為山羊）。而同理，如果一抗為羊抗il-2，二抗可以選標(biāo)記的兔抗羊igg，封閉血清選擇正常兔血清。
使用時(shí)，可以用pbs將正常血清稀釋20倍，直接滴加在切片上，37℃度10-30分鐘，直接甩掉，不洗，輕輕的吸一下旁邊的液體，再加一抗。聽(tīng)說(shuō)4℃過(guò)夜比起37℃兩小時(shí)背景會(huì)干凈一些。當(dāng)然，時(shí)間也會(huì)長(zhǎng)一些。
關(guān)于抗體質(zhì)量，也許種類(lèi)太多，我們要努力的路還很長(zhǎng)。