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糖化白蛋白檢測(過氧化物酶法)的檢驗原理

發(fā)布時間:2024-05-02
糖類的營養(yǎng)價值主要是供給能量,此外糖也是人體的重要組成成分之一。正常人體內(nèi)糖代謝的中心問題之一是維持血糖濃度的相對恒定。臨床上重要的糖代謝紊亂也主要是血糖濃度過高(高血糖癥)和過低(低血糖癥)。
糖化蛋白是指血液中已糖通過非酶促作用,將糖基加到蛋白質(zhì)的氨基酸基團(tuán)上形成的不可逆糖蛋白結(jié)合物,一般分為糖化血紅蛋白(hba1c)以及糖化白蛋白(ga)。
關(guān)于糖化白蛋白檢測(過氧化物酶法):
(1)預(yù)期用途(intended use)
用于體外定量測定人血清中糖化白蛋白(ga)和白蛋白(alb),得出的糖化白蛋白濃度除以白蛋白濃度算出糖化白蛋白的比值(%)。本試劑僅應(yīng)用于體外診斷試驗。
(2)檢驗原理
1、ga的測定
在樣本(血清或血漿)中,首先加入對白蛋白有特異性的蛋白酶,分解糖化白蛋白,生成糖化氨基酸;然后糖化氨基酸在特異性果糖基氨基酸氧化酶(faod-e)的作用下變成葡萄糖醛酮、氨基酸和過氧化氫;在過氧化物酶的作用下,過氧化氫與4-氨基安替比啉和2-羥基-3-間甲苯胺丙磺酸鈉發(fā)生trinder反應(yīng),生成紅色醌亞胺,測定其吸光度變化,得到樣本中糖化白蛋白的濃度。
2、alb的測定利用白蛋白可與某些陰離子染料結(jié)合,而球蛋白基本不結(jié)合這些染料的特性,血清白蛋白(alb)的檢測可根據(jù)使用試劑的不同分為bcg法(bromcresol green,溴甲酚綠)和bcp法(bromcresol purple,溴甲酚紫)。因bcg法靈敏度高、重復(fù)性好,目前國內(nèi)alb的檢測以bcg法最為常用,但bcg對血清白蛋白特異性稍差,bcp法測定白蛋白能有效增強(qiáng)低蛋白血癥患者中測定結(jié)果的可信度,可以避免抗壞血酸及高熱量氨基酸輸液對檢測結(jié)果的影響[5]。
3、糖化白蛋白值(%)的計算
利用得出的ga濃度除以alb濃度,計算出樣本的糖化白蛋白(%)。
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