植物內(nèi)生菌是指那些在其生活史的一定階段或全部階段生活于健康植物的各組織和器官內(nèi)部的真菌或細(xì)菌，其存在一般不導(dǎo)致宿主產(chǎn)生可見(jiàn)的病癥。利用植物內(nèi)生菌進(jìn)行工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)某些緊缺和新型藥物，為解決某些藥用植物生長(zhǎng)緩慢、資源短缺等因素帶來(lái)的藥源緊張和生態(tài)破壞問(wèn)題提供了新思路；植物內(nèi)生菌能夠產(chǎn)生活性物質(zhì)，可作為生物防治資源、外源基因的載體和新藥的來(lái)源，在農(nóng)藥、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域有著巨大的應(yīng)用潛力，現(xiàn)巳成為微生物學(xué)，植物保護(hù)學(xué)及植物育種學(xué)等多種學(xué)科的研究重點(diǎn)。
茶樹(shù)真菌群落是茶園生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分，它在維持該系統(tǒng)的物質(zhì)流動(dòng)和能量轉(zhuǎn)換具有重要作用，同時(shí)它對(duì)于茶樹(shù)的生長(zhǎng)發(fā)育及各種病害發(fā)生與流行有直接的影響。本文綜述了茶樹(shù)內(nèi)生真菌的種類、分布特征以及生物學(xué)作用，豐富茶樹(shù)內(nèi)生菌理論，為茶樹(shù)病害微生物防治提供了新思路，為利用內(nèi)生微生物改善茶樹(shù)營(yíng)養(yǎng)、提高茶葉品質(zhì)創(chuàng)造條件。
1茶樹(shù)內(nèi)生真菌的種類
植物內(nèi)生真菌的資源非常豐富，目前有80個(gè)屬、290多種禾本科植物及多種草本、灌木、栽培作物和一些低等植物中發(fā)現(xiàn)內(nèi)生真菌的存在盧東升等，對(duì)茶樹(shù)內(nèi)生真菌的種類做了大量研究，結(jié)果表明，豫南茶區(qū)芽葉棲真菌有26屬40 種，多數(shù)為半知菌，部分為子囊菌，少數(shù)為接合菌。其中，細(xì)交鏈孢霉茶園赤星病菌旋絲毛殼菌、黑腐菌、茶炭痕病菌^、茶褐斑大莖點(diǎn)霉 茶枝腐病菌、茶輪斑病菌、多色擬盤(pán)多毛抱菌 、木毒等10種真菌為優(yōu)勢(shì)種。同時(shí)， 盧東升等1。還對(duì)豫南茶園內(nèi)生真菌種類鑒定得出，內(nèi)生真菌7科15屬18種，其中刺盤(pán)孢菌，擬盤(pán)多毛抱菌，擬莖點(diǎn)霉菌，大莖點(diǎn)霉菌等4種真菌在各茶園樣地均有分布，是優(yōu)勢(shì)內(nèi)生真菌。謝麗華研究表明優(yōu)勢(shì)的內(nèi)生真菌屬于球座菌屬擬盤(pán)多毛孢屬、刺盤(pán)孢屬的真菌。陳暉奇對(duì)茶樹(shù)內(nèi)生真菌做了初步研究，從994個(gè)不同的茶樹(shù)組織塊中分離出553個(gè)真菌分離物，占優(yōu)勢(shì)的內(nèi)生真菌分別屬于球座菌屬、擬盤(pán)多毛孢屬、炭疽菌屬和黑曲毒游見(jiàn)明對(duì)茶樹(shù)中內(nèi)生菌的動(dòng)態(tài)分布做過(guò)研究，從茶樹(shù)的根、莖、葉中分離得到143株內(nèi)生真菌， 經(jīng)顯微形態(tài)特征觀察鑒定為14個(gè)屬，其中根部62株涉及11個(gè)屬，莖部55株涉及9個(gè)屬，葉部26株涉及6個(gè)屬。武漢琴利用傳統(tǒng)的分離方法從茶樹(shù)的莖葉中分離得到多株內(nèi)生真菌，初步鑒定主要是屬于球座菌屬、擬盤(pán)多毛孢屬、刺盤(pán)孢屬的真菌，還有少量的木霉屬。在國(guó)外，agusta等采用rapd分析對(duì)茶樹(shù)內(nèi)生真菌進(jìn)行了分類，將分離獲得的35株內(nèi)生真菌劃分為六個(gè)類群：其中一組為鐮刀菌屬一組為青霉屬兩組為裂褶菌屬，另兩組為間座殼屬。osono對(duì)同屬植物山茶花（分離得到內(nèi)生真菌44種，在山茶葉片上，膠孢炭疽菌和尖抱炭組是內(nèi)生真菌的優(yōu)勢(shì)種。
根據(jù)以上研究，結(jié)合相關(guān)真菌的資料,茶樹(shù)葉片的真菌主要是：擬盤(pán)多毛抱屬芽枝霉屬短梗毒屬、青霄屬、曲霄屬、嫌刀菌屬、球座菌屬、刺盤(pán)孢菌屬、鏈格孢屬、尾抱屬、頭抱屬、長(zhǎng)螺抱屬、大莖點(diǎn)毒屬、茶葉葉點(diǎn)霉屬、刺盤(pán)孢菌屬球座菌屬等。
2茶樹(shù)內(nèi)生真菌的分布特征
植物內(nèi)生真菌具有普遍性，內(nèi)生真菌存在于低等的藻類植物、苔蘚植物和蕨類植物到高等的裸子植物、被子植物〔單子葉植物和雙子葉植物） 等多種植物組織中，遍及整個(gè)植物界。茶樹(shù)內(nèi)生真菌的分布同樣具有普遍性和多樣性。很多研究表明，在茶樹(shù)內(nèi)生真菌的系統(tǒng)分離過(guò)程中，在不同的取樣地點(diǎn)、不同的季節(jié)及茶樹(shù)的不同組織對(duì)內(nèi)生真菌的分布存在較大的差異。
2.1茶樹(shù)內(nèi)生真菌分布的普遍性和多樣性
健康茶樹(shù)組織中內(nèi)生真菌分布普遍，除花瓣夕卜，茶樹(shù)不同組織中均能不同程度地分離到，特別是在葉片和枝條中，內(nèi)生真菌豐富，成熟葉片中的分離頻率高達(dá)93.88%-100%。內(nèi)生菌具有豐富的生物多樣性，對(duì)同一植物而言，從中可分離到的內(nèi)生真菌通常為數(shù)種至數(shù)十種，有的多達(dá)數(shù)百種。自同一茶樹(shù)葉片中可分離到3種以上內(nèi)生真菌，最多可分離到6種內(nèi)生真菌。
2.2內(nèi)生真菌在茶樹(shù)不同組織的分布
謝麗華等研究表明，隨著茶樹(shù)葉片的成熟， 葉片中內(nèi)生真菌#種類與數(shù)量逐漸增多，與葉片齡期呈正相關(guān)，葉片齡期影響茶樹(shù)內(nèi)生真菌的種群結(jié)構(gòu)。陳暉奇1表明，茶樹(shù)內(nèi)生真菌的分布具有明顯的組織專化性。在其種類和數(shù)量上，表現(xiàn)為葉、枝條〉花托、種托〉種皮、根〉芽、種胚〉花瓣的明顯趨勢(shì)；葉芽中以內(nèi)生細(xì)菌的分布為主，分離頻率占65%，而在成熟葉片中則以內(nèi)生真菌為主， 分離頻率占93.88%內(nèi)生真菌在茶樹(shù)不同組織中的分布特征可能與茶樹(shù)不同組織所含的化學(xué)物質(zhì)有關(guān)。戴清良研究中，在茶樹(shù)的枝條和葉片中能分離到相對(duì)較為豐富的內(nèi)生炭疽菌，但在主莖、根、花和果實(shí)等部位難于分離獲得內(nèi)生炭疽菌；徐焰平研究結(jié)果表明，芒果球座菌主要分布于茶樹(shù)葉片中，分離率達(dá)69.91%；枝條中的分離率很低，只占3.09%；而在其他的器官如根、種子和花中，沒(méi)有分離到芒果球座菌。
茶樹(shù)是多年生木本植物，在生長(zhǎng)過(guò)程中，茶樹(shù)不同的組織與飄浮于空氣中的真菌孢子接觸的機(jī)會(huì)是有差異的，葉和枝條由于生長(zhǎng)期較長(zhǎng)，其與真菌接觸的機(jī)會(huì)明顯比花和果實(shí)大，這可能是內(nèi)生真菌在葉和枝條中分布較多的部分原因；茶樹(shù)的芽和種子，由于分生組織的特性，其組織內(nèi)的內(nèi)生微生物相對(duì)較少，這種現(xiàn)象在許多植物中都有發(fā)現(xiàn)。但在一些植物的芽和種子中，內(nèi)生菌的存在也是很普遍的現(xiàn)象，如在歐洲赤松的芽中經(jīng)常可分離到細(xì)菌，牧草內(nèi)生真菌可通過(guò)種子傳播到下一代等。茶樹(shù)葉片影響內(nèi)生真菌分布的主要原因可能是因?yàn)椴煌诘娜~片所含的化學(xué)成分不同，有些內(nèi)生真菌可感染茶樹(shù)的芽和幼葉，有些則比較困難。
2.3不同季節(jié)對(duì)內(nèi)生真菌分布的影響
由于內(nèi)生真菌的隱蔽性，對(duì)植物內(nèi)生真菌分布的季節(jié)變化，系統(tǒng)的報(bào)道很少。不同季節(jié)取樣的分離結(jié)果發(fā)現(xiàn)：雨季分離獲得的內(nèi)生真菌種類和數(shù)量一般比旱季多。李小容茶樹(shù)內(nèi)生真菌分離率及真菌數(shù)量均隨著季節(jié)變化的影響，從2月至10月，兩茶樹(shù)品種分離得到的內(nèi)生真菌種屬在5月和10月最高，2月最低，內(nèi)生真菌的檢出率隨著不同季節(jié)有所變化，存在著顯著差異。徐焰平研究結(jié)果表明，芒果球座菌在茶葉中常年都有分布，分離率最低是3月，為15.37%，分離率最高是7月，為72.5%。 一年之中2月到4月是芒果球座菌分布的低潮期，而5月、7-9月和12月-次年1 月是高峰期，其中6月的分布也相對(duì)較低，只有26.9%?？傮w上芒果球座菌的分布在春季較少，7 月-次年1月均維持較高水平，分離率在335.8%-72，5%之間。
3茶樹(shù)內(nèi)生真菌的生物學(xué)作用
內(nèi)生真菌的生物學(xué)作用研究較多，主要有三個(gè)方面，第一是內(nèi)生真菌的固氮作用，有些內(nèi)生真菌具有強(qiáng)的抗酸能力，能在高糖環(huán)境中生長(zhǎng)和保持高效的固氮活性并與寄主植物建立聯(lián)合固氮作用，表現(xiàn)嚴(yán)格的寄主專一性。第二，內(nèi)生真菌能產(chǎn)生促植物生長(zhǎng)物質(zhì)，如植物生長(zhǎng)素、赤霉素以及細(xì)胞激動(dòng)素等，直接促進(jìn)植物生長(zhǎng)，內(nèi)生菌也能通過(guò)增強(qiáng)植物吸收n、p等營(yíng)養(yǎng)元素，或與病原菌競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)和空間或直接產(chǎn)生拮抗物質(zhì)而抑制病原菌， 從而間接促進(jìn)植物生長(zhǎng)。第三，內(nèi)生真菌增強(qiáng)宿主植物抗逆境、抗病蟲(chóng)害等作用。
3.1茶樹(shù)內(nèi)生真菌與茶葉特征成分的相互作用
從進(jìn)化的意義上，內(nèi)生真菌和茶樹(shù)長(zhǎng)期共生，協(xié)同進(jìn)化，成為茶樹(shù)組織中不可分割的一部分，特別是現(xiàn)在以無(wú)性繁殖為主的茶樹(shù)栽培模式中。內(nèi)生真菌與植物的互作關(guān)系受植物體所含化學(xué)成分的影響，包括了寄生到互惠共生的不同層次，而每一層次都是植物-真菌相互作用達(dá)到平衡的結(jié)果。茶樹(shù)的某些內(nèi)生真菌能夠改變兒茶素的化學(xué)結(jié)構(gòu)，將其變?yōu)槠渌镔|(zhì)。由于內(nèi)生真菌的侵染，組培茶苗的代謝產(chǎn)物發(fā)生了顯著改變，可能是因?yàn)閮?nèi)生真菌與其宿主基因之間發(fā)生了某種相互作用，而改變了宿主植物的一些代謝途徑。離體條件下，許多的植物內(nèi)生真菌能產(chǎn)生豐富的、包括多酚類物質(zhì)在內(nèi)的抗菌性代謝產(chǎn)物,也可能由于內(nèi)生真菌處于茶樹(shù)這種適宜的生存環(huán)境中，本身產(chǎn)生了較多的茶多酚、咖啡堿等次生代謝產(chǎn)物而影響了最終茶樹(shù)的次生代謝產(chǎn)物的總產(chǎn)量。謝麗華等研究表明，不同齡期葉片水浸提液對(duì)炭疽病菌、擬盤(pán)多毛孢菌、球座菌三種茶樹(shù)上的主要內(nèi)生菌的生長(zhǎng)產(chǎn)生不同的影響；在pda培養(yǎng)基中添加15%的茶多酚，對(duì)此3種內(nèi)生真菌均有一定的抑制作用，但抑制程度有所不同，表明茶樹(shù)葉片的化學(xué)成份是影響內(nèi)生真菌分布的重要因素之一。戴清良1231研究表明內(nèi)生炭疽菌的感染導(dǎo)致茶葉細(xì)胞中多酚類物質(zhì)的積累，有的茶樹(shù)內(nèi)生真菌在搖瓶條件下能產(chǎn)生茶多酚，表明內(nèi)生真菌可能對(duì)茶葉的生化代謝產(chǎn)生一定的影響。徐焰平的研究中檢測(cè)芒果球座菌的次生代謝產(chǎn)物是否含有茶葉的組成成分，挑選芒果球座菌進(jìn)行藥瓶培養(yǎng)，其發(fā)酵液進(jìn)行與處理后用液相色譜分析，推測(cè)是茶多酚中的表兒茶素沒(méi)食子酸酯或者表兒茶素沒(méi)食子酸酯的類似物。曾如意的研究結(jié)果表明，芒果球座菌對(duì)茶多酚有很強(qiáng)的分解能力，這就可以解釋芒果球座菌可以克服茶多酚等物質(zhì)的抑制，順利侵人茶葉里，并寄生在茶葉里。
3.2茶樹(shù)內(nèi)生真菌的抑菌作用
通過(guò)共生菌的存在可抑制有害菌的發(fā)生，并給茶葉在品質(zhì)改良上提供有益的營(yíng)養(yǎng)因子。內(nèi)生真菌對(duì)外源微生物感染有著抑制作用，因?yàn)閮?nèi)生菌來(lái)源于致病性降低或喪失的病原菌，病原喪失某一與致病性相關(guān)的表達(dá)，病原菌轉(zhuǎn)變?yōu)閮?nèi)生菌， 并能誘導(dǎo)植物產(chǎn)生多種與抗病性相關(guān)的生化反應(yīng)1。內(nèi)生真菌的感染促進(jìn)茶樹(shù)抗病性表達(dá)， 如內(nèi)生木霉的感染可導(dǎo)致可可樹(shù)苗抗氧化水平提高，促進(jìn)一系列與營(yíng)養(yǎng)、抗性相關(guān)基因的表達(dá)。戴清良研究認(rèn)為，內(nèi)生菌具有茶樹(shù)葉部病原菌防治作用。內(nèi)生炭疽菌是茶樹(shù)體內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌， 這些真菌在葉片組織中形成密集的局部侵染點(diǎn)，這種生態(tài)“占位效應(yīng)“可能對(duì)病原菌的人侵產(chǎn)生重要的抑制作用|；同時(shí)，在內(nèi)生真菌的侵染點(diǎn)，誘導(dǎo)抗性也可能發(fā)揮一定的作用。蘇經(jīng)遷等^研究表明，茶樹(shù)內(nèi)生