技術服務介紹
細胞劃痕(修復)法是一種簡捷的測定細胞遷移運動與修復能力的方法,類似體外傷口愈合模型。在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細胞上,用微量槍頭或其他硬物在細胞生長的*區(qū)域劃線,去除*的細胞,然后繼續(xù)培養(yǎng)細胞至設定時間(采用無血清或低血清(<2%)排除細胞增殖的影響),取出培養(yǎng)板,觀察周邊細胞是否生長(修復)至*劃痕區(qū),以此判斷細胞的生長遷移能力。通常設定正常對照組與實驗組,實驗組中添加某些處理因素或藥物、外源性基因等,通過不同分組之間的細胞對于劃痕區(qū)的修復能力,判斷比較各組細胞的遷移與修復能力。
技術服務內(nèi)容
1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻的劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2.在孔中加入約5×105個細胞,培養(yǎng)細胞至匯合度達到90%以上。
3.用槍頭比著直尺,垂直于背后的橫線劃痕。
4.pbs洗細胞3次,去除劃下的細胞,加入無血清培養(yǎng)基。
5.放入37℃5% co2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。按0,12,24,48h時間點取樣,100倍鏡下拍照。如果細胞遷移(修復)能力較強,需相應縮短觀察時間間隔。(一般選取兩個時間點)
客戶需知
1)、客戶需提供生長狀態(tài)良好的實驗細胞及細胞培養(yǎng)條件;
2)、客戶需準確告知實驗設計內(nèi)容,如樣本采樣時間點等。
實驗周期
20個工作日(具體實驗周期視實驗設計方案而異)
收費標準
歡迎咨詢創(chuàng)凌生物!