人工合成色素是以苯、甲苯、萘等化工產(chǎn)品為原料,經(jīng)過(guò)較復(fù)雜的工藝過(guò)程合成的,故具有一定的毒性,但因其成本低,色澤鮮艷,著色力強(qiáng)而被廣泛使用。但使用過(guò)量會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生有害作用, 因而我國(guó)規(guī)定了人工合成色素的使用*和檢測(cè)方法。至目前止, 我國(guó)批準(zhǔn)使用的食用合成色素中zui常用的有胭脂紅、莧菜紅、檸檬黃、日落黃和亮藍(lán)等, 使用范圍于飲料、配制酒、糖果、糕點(diǎn)和青梅等, 禁止用于腌（蜜錢(qián)）類(lèi)、魚(yú)類(lèi)、及其制品（紅腸腸衣除外）, 且紅在腌（蜜錢(qián)）灌腸中*規(guī)定為0.015 g/kg, 西式火腿中*為0.025 g/kg。由于國(guó)標(biāo)中人工合成色素檢測(cè)方法中沒(méi)有包括熟食腌（蜜錢(qián)）制品, 為了配合食品安全的監(jiān)督, 本文借鑒國(guó)標(biāo)中人工合成色素的前處理方法, 加以改進(jìn), 對(duì)腌（蜜錢(qián)）制品中的6 種人工合成色素進(jìn)行分離檢測(cè), 得到了滿(mǎn)意結(jié)果。
1 材料與方法
1.1 儀器與試劑
儀器: lc-500hplc液相色譜儀
試劑: 人工色素標(biāo)液（ 檸檬黃, 莧菜紅, 胭脂紅, 日落黃, 亮藍(lán)） : 0.5 mg/ml, 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心提供; 紅（ 80%） : sigma- aldrich,inc 提供; 聚酰胺粉: 100 目; 醋酸銨, 石油醚: （ 30- 60 ℃） ; 檸檬酸溶液:20 g/l; 甲醇- 甲酸溶液: （ 6∶4）v/v; 無(wú)水乙醇—氨水—水溶液: （ 7∶2∶1）v/v;甲醇（ 色譜純） ; 冰乙酸。所用試劑除甲醇外均為分析純。
、儀器配置
pos
product number
qty
1
tz500-010
2
高壓
lc-500a pumpincludespump, solvent cabinet, 2 solvent bottles and can cable.
2
tz500-010
1
mixer-500靜態(tài)混合器
model 500 mixer
4
tz500-016
1
儀器啟動(dòng)工具包
hplc starter kit incl. 0.17mm id cap
5
tz500-040
1
spd-500可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器
spd-500 variable wavelength detector includes variable wavelength detector with deuterium lamp and can cable. no flow cell included.
6
tz500-027
1
7725i手動(dòng)進(jìn)樣閥
7
tz500-028
1
c18 250*4.6
8
tz500-45
1
溶劑托盤(pán)
9
tz500-112
1
色譜工作軟件
hplc 2d chemstation software for data acquisition.
10
恒溫水浴 hh-2
1
柱溫箱
11
樣品前處理包
1
（超聲波1臺(tái)，真空泵1臺(tái)，溶劑過(guò)濾器1套，
濾器、濾膜各2包）
定量方法:外標(biāo)法
1.3 樣品處理
1.4 計(jì)算
x = c ×v ×1000
m ×1000
x ─ 試樣中合成色素的含量, g/kg;
m ─ 樣品質(zhì)量, g;
v ─ 樣品定容后的體積, ml;
c ─ 測(cè)定用樣品液中合成色素的濃度, mg/ml
2 結(jié)果
2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系實(shí)驗(yàn)分別配制各組分濃度相等的混合標(biāo)準(zhǔn)系列, 濃度為0.01、0.04、0.06、0.08、0.10 mg/ml （ 其中紅的濃度折算80%） , 進(jìn)樣量20μl 進(jìn)行液相色譜分析, 用峰面積與濃度進(jìn)行線性回歸。各自的特征光譜圖如圖1 所示,及各組分的出峰情況如圖2 所示,線性方程及各自相關(guān)系數(shù)r 如表2 所示:表2! 各組分人工合成色素標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程及相關(guān)系數(shù)
39
2.2 zui低檢測(cè)量
采用3 倍信噪比時(shí)所對(duì)應(yīng)的濃度, 由此計(jì)算出zui低檢出量為: 檸檬黃1.4×10- 5 mg/ml, 莧菜紅2.8×10- 5 mg/ml, 胭脂紅2.8×10- 5 mg/ml, 日落黃3.0×10- 5 mg/ml, 紅1.6×10- 5 mg/ml, 亮藍(lán)6.0×10- 4 mg/ml。
2.3 回收率實(shí)驗(yàn)
將樣品精密量取后, 分別加入一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液制成高、中、低3 個(gè)濃度的加標(biāo)樣品, 每個(gè)濃度取5 個(gè)
平行樣品, 經(jīng)前處理過(guò)濾后, 用hplc 分析測(cè)得其回收率分別為檸檬黃: 93.7%～96.2%、莧菜紅: 88.6%～95.4%、胭脂紅: 90.3%～100.3%、日落黃: 94.3%～98.7%、紅:94.8%～98.1%、亮藍(lán): 89.8%～94.4%（ 見(jiàn)表3） 。
3 討論
由于國(guó)標(biāo)中關(guān)于合成色素的檢測(cè)無(wú)腌（蜜錢(qián)）制品的處理方法, 故本文借鑒國(guó)標(biāo)中對(duì)其他產(chǎn)品的處理方法, 又因檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、紅、亮藍(lán)等人工合成色素均為水溶性, 依據(jù)相似相溶原理采用石油醚去除腌（蜜錢(qián)）制品中的油脂, 從而減少了因油脂堵塞g3 漏斗導(dǎo)致的抽濾不暢, 大大提高了色素的提取速度。同時(shí)也減少了樣品中色素的損失。實(shí)現(xiàn)了腌（蜜錢(qián)）制品中6 種常用人工合成色素的同時(shí)快速檢測(cè)。
工藝技