嵌合抗體一般是指將一個(gè)物種的抗體恒定區(qū)換成另一個(gè)物種的。zui早使用此項(xiàng)技術(shù)是將鼠抗體改造為人鼠嵌合抗體。嵌合抗體既保留了親本抗體特異性結(jié)合抗原的能力，又減少了鼠源抗體在人體中的免疫原性，其半衰期明顯延長(zhǎng)，且在介導(dǎo)cdc及adcc方面亦明顯增強(qiáng)。
人-鼠嵌合抗體：利用dna重組技術(shù)將鼠源單抗的輕鏈、重鏈可變區(qū)插入含有人抗體恒定區(qū)的表達(dá)載體中，轉(zhuǎn)化哺乳動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行表達(dá)所產(chǎn)生的單克隆抗體（圖1）。人-鼠嵌合抗體的人源化程度可達(dá)到70%，完整的保留了鼠源單抗的可變區(qū)及親本活性，人抗體恒定區(qū)的引入則降低了免疫原性。
基本原理：
人鼠嵌合抗體基本原理是從分泌某種鼠單抗的雜交瘤細(xì)胞基因組中分離并鑒定出重排的功能性鼠vl（輕鏈可變區(qū)）和vh（重鏈可變區(qū)），經(jīng)過基因重組分別與人的cl（輕鏈恒定區(qū)）和ch（重鏈恒定區(qū)）區(qū)基因按照一定的方式相拼接，克隆到表達(dá)載體中構(gòu)建鼠/人輕重鏈基因表達(dá)載體，并轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞表達(dá)來制備特異性嵌合抗體。
對(duì)于其他類型的人源化抗體，其優(yōu)勢(shì)在于，技術(shù)路線簡(jiǎn)單，易于操作；抗體完整性好，在體內(nèi)滯留時(shí)間長(zhǎng)；鼠源抗體的親和力和特異性都得到保留，在臨床上得到了良好的反應(yīng)。
構(gòu)建人鼠嵌合抗體主要包括：克隆鼠抗體可變區(qū)基因，釣取人抗體恒定區(qū)基因，拼接鼠抗體可變區(qū)基因與人抗體恒定區(qū)基因以及構(gòu)建載體和宿主細(xì)胞。
嵌合抗體的分類
嵌合抗體主要有三種類型：
1、嵌合igg抗體
目前嵌合抗體的研究主要集中在嵌合igg（immunoglobulin g）抗體。其構(gòu)建基本原理是從生產(chǎn)某種鼠源單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞中得到目的抗體v區(qū)（variable region）基因，再與人類的c區(qū)（constant region）基因重組并克隆到合適載體中，然后轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞表達(dá)（如圖1）。
在構(gòu)建嵌合抗體時(shí)應(yīng)根據(jù)不同目的選擇不同的c片段。這是因?yàn)椴煌愋偷娜丝贵wc區(qū)與補(bǔ)體和fc（fragment crystallizable,fc）相互作用的能力以及引發(fā)細(xì)胞溶解的功能不盡相同。在體內(nèi)免疫系統(tǒng)中，抗體的fc段和效應(yīng)細(xì)胞相互作用，發(fā)揮特異的生物學(xué)功能。例如ige（immunoglobulin e）可介導(dǎo)炎癥反應(yīng)等，igm活化補(bǔ)體的能力強(qiáng)，igg1的補(bǔ)體活化能力比igg3強(qiáng)，且在adcc作用（antibody dependent cell mediated cytotoxicity）觸發(fā)能力上也比igg3強(qiáng)。在與fc受體的結(jié)合能力上igg1和igg3比較強(qiáng)，igg4次之，而igg2幾乎檢測(cè)不到。
2、嵌合fab和f(ab')2抗體
嵌合fab（antigen-binding fragment, fab）和f(ab')2（具有兩個(gè)抗原結(jié)合表位的片段）抗體的優(yōu)勢(shì)就是滲透力強(qiáng)。fab嵌合抗體制備原理為：將功能性抗體l,h鏈的v區(qū)基因與人的輕鏈k和h鏈ch1進(jìn)行重組，克隆到表達(dá)載體中，在轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞表達(dá)。不過對(duì)于大多數(shù)該類型的抗體來說，由于親和力較低，分子量小，容易被腎小球過濾而從血液中消失，因此大多數(shù)不適合單獨(dú)使用于臨床治療。
為了改善效果，人們把fab抗體改造成嵌合f(ab')2抗體，提高了其分子量，其藥代動(dòng)力學(xué)也有所改善，取得了一定的治療效果。
義翹神州提供嵌合抗體生產(chǎn)服務(wù)，內(nèi)容包括：
①基因合成及密碼子優(yōu)化
客戶可提供抗體序列或質(zhì)粒作為起始材料。
②載體構(gòu)建
分別克隆抗體重鏈、輕鏈至優(yōu)化的表達(dá)載體
測(cè)序驗(yàn)證
質(zhì)粒生產(chǎn)
③表達(dá)及純化
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染hek293/cho 細(xì)胞
純化抗體
精細(xì)純化（依據(jù)需求進(jìn)行）
④qc分析
sds-page
uv
sec-hplc (可選)
⑤交付內(nèi)容
純化抗體
質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告 (coa)
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