畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)中常用的表達(dá)載體包括分泌表達(dá)載體和非分泌型表達(dá)載體。因此可以根據(jù)基因表達(dá)的目的選擇合適的酵母表達(dá)載體。分泌型表達(dá)載體主要有ppic9,ppic9k,phil-s1,ppicza,pyam75p6;胞內(nèi)表達(dá)的載體主要有:phil- d2,pa0815,ppic3k,ppicz,phwo10,pgapz, pgapza等。
本次主要介紹一下pgapza、pgapzαa和ppic3.5k這三個(gè)載體。
pgapza
pgapzαa
ppic3.5k
啟動(dòng)子
gap
gap
aox1
抗性
zeocin
zeocin
kan/amp
載體標(biāo)記
c-myc, c-his
c-myc, c-his
his4
載體大小
2884bp
3147bp
9004bp
信號(hào)肽
無(wú)
α-factorsecretion signal
無(wú)
碳源
甘油或葡萄糖/無(wú)毒
甘油或葡萄糖/無(wú)毒
甲醇/有毒
受體菌株
gs115
gs115、smd1168、x-33
km71、smd1168、gs115
應(yīng)用
常用于生產(chǎn)胞內(nèi)蛋白的畢赤酵母表達(dá)載體
常用于生產(chǎn)分泌蛋白的畢赤酵母表達(dá)載體
常用于生產(chǎn)胞內(nèi)蛋白的畢赤酵母表達(dá)載體
備注
穿梭型表達(dá)載體,能夠在大腸桿菌和酵母中進(jìn)行遺傳復(fù)制。是以畢赤酵母中磷酸甘油酸脫氫酶
(gap)基因啟動(dòng)子是組成型表達(dá)的,不存在誘導(dǎo)的問(wèn)題,可以在以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基上表達(dá)。
穿梭型表達(dá)載體,能夠在大腸桿菌和酵母中進(jìn)行遺傳復(fù)制。是以畢赤酵母中磷酸甘油酸脫氫酶
(gap)基因啟動(dòng)子是組成型表達(dá)的,不存在誘導(dǎo)的問(wèn)題,可以在以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基上表達(dá)。
插入基因是必需包含起始密碼子atg
載體圖譜:
pgapza載體圖譜:
pgapzαa載體圖譜:
ppic3.5k載體圖譜: