細(xì)胞培養(yǎng)中遇到細(xì)胞空泡化怎么辦?
1、細(xì)胞老化:細(xì)胞處于終末分化狀態(tài),或細(xì)胞傳代次數(shù)過多,老化嚴(yán)重。
2、ph值:培養(yǎng)液的ph值與細(xì)胞正常所需ph值差別太大。
3、胰酶消化:胰酶消化時(shí)間過長或消化細(xì)胞吹打時(shí)力度過大。
4、自噬:細(xì)胞缺乏營養(yǎng)導(dǎo)致饑餓,誘導(dǎo)形成自噬。
5、細(xì)胞代謝:血清濃度不夠,藥物作用、外界刺激等導(dǎo)致細(xì)胞代謝出現(xiàn)問題。
6、污染:衣原體感染、支原體污染、病毒污染。
重點(diǎn)來了,怎么處理?具體問題具體分析。
1、若是因?yàn)榧?xì)胞老化,可復(fù)蘇代數(shù)靠前的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。
2、若是ph更換,培養(yǎng)液調(diào)整到合適的ph值。
3、傳代時(shí),胰酶的濃度合適,選取適當(dāng)?shù)南瘯r(shí)間進(jìn)行消化,避免吹打太過用力
4、保證細(xì)胞培養(yǎng)的營養(yǎng)充足。可通過增加血清濃度和在培養(yǎng)基中加入谷氨酰胺。
5、嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作。盡量使用質(zhì)量好和渠道正規(guī)的胎牛血清。